.1. PCR熔解曲线分析法是做realtime-pcr时分析,用来确定不同的反应产物,包括非特异性产物的分析方法.原理是在扩增反应完成后,通过逐渐增加温度的同时监测每一步的荧光信号来产生溶解曲线,随着反应中双链DNA变性,荧光染料又回复到游离状态导致荧光信号降低,用荧光信号改变的负的一次导数与温度作图,在扩增产物的溶解温度上有一特征峰（Tm,DNA双链解链50的温度）,因为它们在不同的温度溶解,所以用这个特征峰就可以将特异产物与其它产物如引物二聚体区分开.2. 溶解曲线是在正常的PCR反应基础上加一个溶解曲线的反应条件,其中当温度由60升至95时,PCR仪每隔一定的温度检测一次信号.最后 将收集的信号绘制出溶解曲线,然后将溶解曲线一次微分就会得到我们平时看到的峰性图.每一条线代表着某个孔里的反应体系里产物的单一情况,某一条线如果为 单峰且在一定合理的温度范围内（一般为8090）则认为正常,如果为双峰则可能有非特异性扩增.由此可以判断产物是否为目的基因且是否单一.内参有内 参的线,目的基因有目的基因的线,同一条线不会出现两个基因的峰3. 这个一般是用SYBY Gr
