.菌种的接种及菌悬液制备操作程序一、 菌种的接种:1、 菌种的复苏:1.1把冻干菌种管、灭菌1ml毛细滴管、双碟、镊子、营养肉汤培养基、营养琼脂斜面数支,移入接种室或超净工作台。1.2将冻干菌种管外壁用碘酒擦洗消毒、稍干,用75%乙醇棉擦净,放在灭菌双碟内,待干。点燃酒精灯,将菌种管的封口一端在火焰上,烧灼红热,用灭菌毛细滴管吸取营养肉汤培养基,滴在灼热的菌种管封口一端,使冷而炸裂。1.3取灭菌镊子,在火焰旁,将炸裂的管口打开,放入灭菌双碟内,另取一支灭菌毛细滴管,在火焰旁吸取营养肉汤少许,加至菌种管底部,将冻干菌块搅动促使溶解,随即吸出管内菌液,分别接种至营养琼脂斜面置3537培养2224小时。1.4取出培养物,仔细观察菌苔形态、有无杂菌、涂片、革兰氏染色镜检,呈典型菌落后,转种3代即可应用。如发现菌形不典型,可进行平板分离单菌落。2、菌种的接种:2.1准备需用的培养基,培养基应新鲜制备,如斜面已无冷凝水者,不宜再使用。标签上注明菌名及接种日期。自冰箱取出的菌种斜面,应在室温放置约30分钟,待温度平衡后再