.小鼠胚胎成纤维细胞的分离和培养一、实验材料1. 主要仪器设备(1) 倒置显微镜(Olympus,Japan)(2) CO2培养箱(BB16HF,上海力申科学仪器有限公司)(3) 100ml的玻璃培养瓶(江苏海门市大路塑料实验仪器厂)(4) 6孔培养板(COSTAR,每孔直径为3.5cm)(5) Eppendroff管(6) 1ml,2ml,5ml的玻璃滴管各30支;10ml尖底离心管和直径为8cm的平皿(7) 离心机(8) 5ml冻存管(9) 两套小鼠用解剖器械(包括眼科剪和眼科镊)2. 主要试剂配制(1) MEF(mouse embryo fibroblast,小鼠胚胎成纤维细胞)培养液低糖DMEM母液1) 用一个1000ml的大烧杯加入1000ml无菌无内毒素的超纯水(购自福州新北生化工业有限公司);2) 将一小袋低糖DMEM(GIBCO/BRL,Cat.No.31600-034)全部加入上述水中,同时轻轻搅拌,并冲洗包装袋的内面以洗下所有的粉未。3) 每升培养基中添加3.7gNaHCO3。4) 搅拌