.1. 微生物代谢工程定义、研究内容和研究手段。定义:通过某些特定生化反应的修饰来定向改善细胞的特性功能,运用重组DNA技术来创造新的化合物。研究内容:生物合成相关代谢调控和代谢网络理论;代谢流的定量分析;代谢网络的重新设计;中心代谢作用机理及相关代谢分析;基因操作。研究手段:代谢工程综合了基因工程、微生物学、生化工程等领域的最新成果。因此,在研究方法和技术方面主要有下列三大常用手段:(1)检测技术:常规的化学和生物化学检测手段都可用于代谢工程的研究,如物料平衡、同位素标记示踪法、酶促反应动力学分析法、光谱学法、生物传感器技术。(2)分析技术:采用化学计量学、分子反应动力学和化学工程学的研究方法并结计算机技术,阐明细胞代谢网络的动态特征与控制机理,如稳态法、扰动法、组合法和代谢网络优化等。(3) 基因操作技术:在代谢工程中,代谢网络的操作实质上可以归结为基因水平上的操作:涉及几乎所有的分子生物学和分子遗传学实验技术,如基因和基因簇的克隆、表达、调控,DNA 的杂交检测与序列分析,外源DNA的转化,基因的体内同源重组与敲除,整合型重组DNA 在细胞内的稳定维持