.VIGS 操作基本方法Grow cotton seedlings1. 将种子提前3天催芽（建议催芽抹布用开水浸泡洗净，催芽过程中种子不可浸泡在水里，确保抹布湿润即可，期间2-3次补水以保证萌发率），提前1天拌土（建议蛭石：营养土=1：4，完全浸润后多余的水倒出，种子点播于营养钵育苗盘中。2. 将育苗盘放于培养室中，覆盖透明塑料膜， 保持温度25， 光照120EM，16h光照，8h黑暗，3-4天后揭膜。3. 待幼苗长至第10天左右，此时子叶已完全平展，真叶未展开，植株用于VIGS分析。Perform VIGS inoculation1. 接种前2天的晚上，把保存于80的农杆菌菌株 pTRV1（据需求调整活化量）、pTRV2、pTRV-Gene、 CLA活化。20L 菌液加入 1 ml LB （50 g/ml Kan+, 25 g/ml Rif） 于2 ml 离心管中培养，28 200rpm 过夜2. 接种前 1 天晚上，接大样。将活化后的菌株加入 10ml LB于50ml锥形瓶，28 200rpm 16h左右。3. 约16 h
