PCR与电泳步骤和注意事项.doc

.一， 组织分拣，每个待使用的EP管中仅保留一块组织即可，多余组织予以剔除，采用移液器枪头。二， 使用DNA-away擦拭操作台及离心机处，（操作台旁放置黄色口袋以放置废弃物）三， 组织预处理：（1）稀释碱裂解液： 采用1ml枪吸取5ml碱裂解液至试管，并加入45ml灭菌水（使得碱裂解液由10x变为1x）。 （2）使用200ul枪吸取75ul碱裂解液至组织试管中。(枪头不接触EP管前提下，可反复使用) （3）将组织试管轻轻甩动，使得组织浸泡于液体中，进行离心12k,1min (4) 将样本试管置于95摄氏度下水浴20分钟（试管上方可放置多孔板压住，以防液体压力过大喷溅出来）。 （5）充分冷却（可置于4冷室）后继续离心12k,1min （6）离心后每份标本中加入75ul Tris-hcl(震荡混匀，箱子里的仪器) (枪头不接触EP管前提下，可反复使用) （7）再次离心5分钟