.死时间(dead time,t0)-不保留组分的保留时间。即流动相(溶剂)通过色谱柱的时间。在反相HPLC中可用苯磺酸钠来测定死时间。死体积(dead volume,V0)-由进样器进样口到检测器流动池未被固定相所占据的空间。它包括4部分:进样器至色谱柱管路体积、柱内固定相颗粒间隙(被流动相占据,Vm)、柱出口管路体积、检测器流动池体积。其中只有Vm参与色谱平衡过程,其它3部分只起峰扩展作用。为防止峰扩展,这3部分体积应尽量减小。V0Ft0(F为流速) 梯度方法的建立:Rs:分离度,表示两峰分离程度的物理量。k:容量因子,表示某溶质在固定相和流动相中物质的量的比,在等度洗脱中。一种物质的k值是恒定不变的。上面两试针对的是梯度洗脱,表示的平均容量因子。a:分离因子,两个溶质的容量因子的比。通常k大的作为分子。表示两物质分离能力的大小。N:理论塔板数,表示柱子的分离能力,也就是柱效。:梯度时间;F:流速;:死体积;:梯度变化范围。常见问题和维护:
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