1、 1 毕业论文 开题报告 生物工程 生物自显影法筛选白蔹酯提物抗菌活性 1 选题的背景和意义 几十年前，人类还在致力于化学药品的研究，然而随着科技的进步，化学药物的危害被逐渐发觉，生物药开始成为人类的新最求，其中的关键性步骤就是生物活性物质的提取和鉴定，传统的方法是采用活体实验的方法，很明显该方法弊端太大，于是微量活性测定方法即成为最主要的方法，发展至今日，已经存在多种方法，如微生物抑制法，酶法，免疫测定法等，但是这些方法都具有明显的局限性，如微生物抑制法德灵敏度不够高，酶法与放射性免疫测定法成本太过昂贵，不适合量 产，而生物自显影法则很好的解决了这些问题，他不但操作简单快速，灵敏度高，而且成
2、本低廉，适用性广，可以说是药物筛选的通用方法， 2 相关研究的最新成果及动态 生物自显影技术是一项还处于发展前期的技术，从最初的 TLC 生物自显影法，到现在的 HPTLC 和 2D 生物自显影技术也才经历了几十年的时间，近几年来，多位研究者将生物自显影技术应用到检测植物体内抗菌活性成分，运用该法能够快速得到结果，所以该法也成了快速的代名词。 3 课题的研究内容及拟采取的研究方法（技术路线）、难点及预期达到的目标 3.1 课题研究内容 探索 白 蔹脂提物中是否有物质对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有抑菌作用。 3.2 研究方法 （ 1） 菌种 的选择 大肠杆菌和金黄色葡萄球菌 （ 2）菌悬液的制备
3、在无菌条件下制备不同浓度的菌悬液，形成对比梯度。 2 （ 2）培养基的制备 将上述制备的菌悬液加入到融化状态的培养基中，摇匀后倾注平皿，盖上盖子等待培养基凝固。 （ 3）白蔹酯提物溶液的制备的制备 选用实验室已提取的白蔹酯提物， （ 4）薄层板的制备 选取质量较好，表面平整的玻璃片 30% 的盐酸浸泡玻璃板 10min 自来水冲洗洗 衣粉水浸泡 10min 自来水冲洗 竖着放置烘干称取一定量的薄层层析硅胶加少量水(2-2.5 倍 )研磨均匀涂板平放，室温下自然干燥 100 度除水活化 1 小时用纸包好放入干燥器备用。 （ 5）硅胶板层析 用铅笔在已活化的硅胶板下端处划一平行于底边的细线并等距离
4、标志点样点。点样采用微量进样器，标准点样量，展开采用立式玻璃展开槽展开。层析结束时取出硅胶板 ,，及时用铅笔标记溶剂前沿，于室温下将溶剂自然挥发至干，待检。 （ 6）反应 将已层析完并挥去展开剂的硅胶板贴于凝固培养基上 , 盖好平皿 , 静置一段时间使抑菌活性物质扩散到培养基中，将硅 胶板轻轻揭下 , 平皿置于培养箱中 3 7 ，培养一定时间即可观察分离状况。 （ 7）染色 在培养结束的平皿中加入染色用的品红液，倒去后观察结果，得出最佳浓度。 （ 8）展开剂的选择 做同样浓度的不同展开剂的实验（在确定最佳提取物浓度前） （ 9）贴板时间与培养时间的确定 不同贴板时间与培育时间得到的抑菌效果不同
5、（在确定最佳提取物浓度前） 3.3 课题难点及预期目标 课题的难点在于确定最适的 提取物的浓度和最佳实验条件，这个只能通过反复的实验确定。实验结果为载培养基上出现规则抑菌斑 。 4 论文工作进度和安排 2010 年 11 月 22 日 学生选题，布置论文任务； 3 2011 年 1 月 10 日 完成外文翻译、文献综述和开题报告等工作； 2011 年 5 月 23 日 进行课题的实验、设计、调研及结果的处理与分析等，完成毕业设计说明书或论文写作，进行毕业设计（论文）的修改完善； 2011 年 6 月 10 日 毕业设计（论文）答辩。 5 参考文献 1 李红娟 .白蔹的药理作用及临床应用 J.食
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