2021甲基化实验步骤.docx

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资源描述

甲基化实验步骤一重亚硫酸盐修饰基因组DNA的制备采用EZ DNA Mehtylation-Gold Kit TM D5005试剂盒,按照操作说明书分别对提取的Blank、Cya基因组DNA进行重亚硫酸盐修饰。1.分别吸取10L Blank和Cya DNA样品到PCR管中,加入10L 水补足20L,每个样品加130L CT conversion reagent。轻弹管子或者用枪吹打混匀,离心使液体沉到管底。2.将管子放到热循环仪中,运行以下步骤:1.98 10min2.64 2.5h3.4保存可至20h3.加600L M-Binding Buffer 到Zymo-Spin TM IC Column, 柱子放在提供的收集管中。4.把样品(来自步骤2)加到装M-Binding Buffer的Zymo-Spin TM IC Column中。盖上盖子,颠倒混匀。5.全速离心(10000g)30s。倒掉流穿液。6.加100L M-Wash Buffer到柱子上。全速离心30s。7.加200L M-Desulphonat

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