1、 1 附件：毕业论文范例 编号（学号）： 04044037 毕 业 论 文 （设 计） （ 2004 届本科） 题 目： 穿山龙黑斑病病原菌鉴定 及其生物学特性初步研究 院 （系）： 植物保护学院 专 业： 植物病理学 姓 名： 白 静 指导教师： 傅俊范 教授 完成日期： 2004 年 06 月 10 日 沈阳农业大学毕业论文 (设计 )专用纸 I 毕业论文（设 计）任务 书 论文 (设计 ) 题目 穿山龙黑斑病病原菌鉴定 及其生物学特性初步研究 下发任 务日期 2003 年 6月 学生姓名 白静 指导老师 傅俊范 教授 一 .论文（设计）主要内容 1、 采用组织分离法对采于 辽宁省清原满族
2、自治县南口前和英额门药材园 穿山龙黑斑病病株叶部组织进行分离，得到一种真菌。根据其形态特征、培养性状等进行病菌鉴定。 2、进行人工接种证病试验，用两种不同的接种方法接种穿山龙健株，从而确定穿山龙黑斑病的致病菌。 3、对该致病菌的生物学特性进行初步研究，具体研究了分生孢子萌发与不同环境因子的关系、分 生孢子的致死温度以及菌落生长与不同环境因子的关系。 二 .论文（设计）的基本要求 1、掌握分离纯化真菌的方法，以及人工接种试验的步骤和方法。 2、熟练掌握对病原菌生物学特性进行研究的方法和步骤。 3、对链格孢的一般鉴定特征如培养性状、形态特征了解掌握。 4、通过毕业论文工作，学习并掌握科研方案的制定
3、、实施、总结和论文报告写作等基本原理和方法。 沈阳农业大学毕业论文 (设计 )专用纸 II 说明：此任务由指导教师填写一式两份，一份发给学生，一份发给指导教师留存。 三 .论文（设计）工作进度安排 阶段 论文（设计）各阶段名称 日期 1 分离纯化穿山龙黑斑病病原菌 2003 年 07 月 2 进行穿山龙人工接种证病试验 2003 年 07 月 3 穿山龙黑斑病病原菌鉴定 2003 年 08 月 4 病原菌链格孢生物学特性的初步研究 2003 年 09 月 -2004 年 06 月 5 论文成稿、预答辩 2004 年 06 月 6 毕业论文答辩 2004 年 06 月 备注： 四 .应收集的资料
4、及主要参考文献（指导教师指定） 1、 有关药用植物穿山龙栽培及生物学特性的文献资料。 2、 有关穿山龙黑斑病的文献资料。 3、 有关对链格孢菌鉴定的资料。 沈阳农业大学毕业论文 (设计 )专用纸 III 沈阳农业大学毕业论文（设计）考核表 论文题目： 穿 山龙黑斑病病原菌鉴定及其生物学特性初步研究 姓名： 白 静 学号： 04044037 专业： 植物保护 指导教师评语： 白静同学在导师指导下，根据本研究室科研基础，结合辽宁东部山区中药材产业发展中出现的实际问题，对穿山龙黑斑病病原菌进行了系统鉴定，并对其生物学特性进行了初步研究，较好完成了毕业论文计划。论文研究结果具有一定理论意义和实用价值，
5、理论上首次明确了穿山龙黑斑病病原菌的分类地位和生物学特性，应用上为该病害田间防治提供了科学依据。 该生在本实验室从事毕业论文研究工作中，虚心好学、积极肯 干，刻苦钻研，尊敬老师，动手能力较强，能充分利用学校网络资源查询相关研究资料，为论文工作的顺利完成进行了充分准备。论文写作规范，能够严格执行学校本科生毕业论文写作的有关规定，并表现出较高的电脑使用和文本编辑水平。 该生论文达到了植保专业本科生毕业论文的要求和水平，同意进行毕业论文答辩。 指导教师（签字）： 傅俊范 2004 年 6 月 20 日 评阅人评审意见： 该论文结合辽宁东部山区中药材产业发展中出现的实际问题，对穿山龙黑斑病菌 进行了系
6、统鉴定，并对其生物学特性进行了初步研究。论文研究结果具有一定理论意义和实用价值，理论上首次明确了穿山龙黑斑病病原菌的分类地位和生物学特性，应用上为该病害田间防治提供了科学依据。 论文写作规范，能够严格执行学校本科生毕业论文写作的有关规定，并表现出较高的电脑使用和文本编辑水平，达到了本科生毕业论文的水平。 评阅人（签字）： 刘志恒 2004 年 6 月 25 日 沈阳农业大学毕业论文 (设计 )专用纸 IV 答辩委员会意见： 该同学在导师指导下，结合辽宁东部山区中药材产业发展中的实际问题，对穿山龙黑斑病病原菌进行了系统鉴定，并对其生物学特性进行了初步研究。论文研究结果具有一定理论意义和实用价值，
7、为该病害田间防治提供了科学依据。 论文理论联系实际，设计合理，写作规范，能够严格执行学校本科生毕业论文写作的有关规定，并表现出较高的电脑使用和文本编辑水平。 该生在论文答辩中，思路清晰，表达比较比较简洁明确，回答问题比较准确。论文达到了植保专业本科生毕业论文的要求和水平，推荐做为优秀论文上报学校。 主任委员（签字）： 刘志恒 2004 年 6 月 25 日 注：答辩委员会意见除填写简要评语、给出成绩外，还要提出是否授予学位的建议。 成绩： 91.0 分 沈阳农业大学毕业论文 (设计 )专用纸 V 毕业论文指导记录 学生姓名 白静 专业 植物保护 指导老师姓名 傅俊范 职称 教授 本年度指 导本
8、科生 人数 7 论文（设计）题目 穿山龙黑斑病病原菌鉴定及其生物学特性初步研究 指 导 过 程 时间 地点 指导内容 2003.3.5 2003.6.14 2003.7.11 2003.8.12 2003.9.5 2003.9.20 2004.6.5 2004.6.13 2004.6.15 2004.6.17 2004.6.19 中药材病害研究室 中药材病害研究室 中药材病害研究室 中药材病害研究室 中药材病害研究室 中药材病害研究室 中药材病害研究室 中药材病害研究室 中药材病害研究室 中药材病害研究室 植病教研室 选择导师，了解学生学习情况和选题意向 根据本研究室科研基础，确认毕业论文选题
9、 穿山龙黑斑病病害症状描述、分离病原菌 查找资料，进行病原菌种类鉴定 进行 穿山龙人工接种证病试验 病原菌链格孢生物学特性的初步研究 与导师、研究生讨论初步试验结果 毕业论文初稿写作及打印 制作论文答辩 PPT 文件 毕业论文预答辩 毕业论文答辩及定稿打印 学生签字： 白静 2004 年 6 月 24 日 指导教师签字： 傅俊范 2004 年 6 月 24 日 教研室主任签字： 刘志恒 2004 年 6 月 25 日 沈阳农业大学毕业论文 (设计 )专用纸 目 录 中文摘要 . 1 英文摘要 . 2 前言 . 4 1材料与方法 . 5 1.1供试材料来源 . 5 1.2症状观察 . 5 1.3
10、寄主上病原菌观察 . 5 1.4病原菌的分离与纯化 . 5 1.4.1病原菌分离 . 5 1.4.2病原菌纯化 . 5 1.5分离菌株的观察 . 6 1.5.1菌落特征观察 . 6 1.5.2分离菌株病原菌观察 . 6 1.5.3分离菌株病原菌着生状态观察 . 6 1.6人工接种试验 . 6 1.6.1接种材料 . 6 1.6.2接种方法 . 6 1.7鉴定 . 7 1.8病原菌的生物学特性研究 . 7 1.8.1分生孢子萌发与不同环境因子的关系 . 7 1.8.1.1分生孢子萌发与温度关系 . 7 1.8.1.2分生孢子萌发与湿度的关系 . 7 1.8.1.3分生孢子萌发与 pH值关系 .
11、7 1.8.1.4分生孢子萌发与营养的关系 . 8 1.8.1.5分生孢子的致死温度测定 . 8 沈阳农业大学毕业论文 (设计 )专用纸 1.8.2菌落生长与不同环境因子的关系 . 8 1.8.2.1菌片的准备 . 8 1.8.2.2菌落生长与光照的关系 . 8 1.8.2.3菌落生长与温度的关系 . 9 1.8.2.4菌落生长与 pH值的关系 . 9 1.8.2.5菌落生长与营养物质的关系 . 9 2结果分析 . 9 2.1穿山龙黑斑病病状描述 . 9 2.2寄主上病原菌形态特征 . 10 2.3培养性状 . 11 2.4分离菌株的形态特征 . 11 2.5人工接种试验 . 11 2.6病原
12、菌生物学特性 . 12 2.6.1分生孢子萌发与温度的关系 . 12 2.6.2分生孢子萌发与湿度的关系 . 13 2.6.3分生孢子萌发与 pH值的关系 . 14 2.6.4分生孢子萌发与营养物质的关系 . 15 2.6.5分生孢子的致死温度 . 16 2.6.7菌落生长与光照的关系 . 16 2.6.8菌落生长与温度的关系 . 17 2.6.9菌落生长与营养物质的关系 . 18 2.6.10菌落生长与 pH值的关系 . 20 3结论 . 20 参考文献 . 22 致谢 . 24 沈阳农业大学毕业论文 (设计 )专用纸 第 1 页 摘 要 穿山龙 (Dioscorea nipponica M
13、akino)别名串龙骨、地龙骨、野山药、穿地龙、穿龙骨，即穿龙薯蓣，为薯蓣科植物穿龙薯蓣多年生缠绕草质藤本药用植物， 产于辽宁、吉林、黑龙江、河北、内蒙古、山西、陕西等省、自治区。 穿山龙有效成份皂素是甾体激素类药物的重要合成原料。长期以来 我国穿山龙的原料主要来源于野生。由于国内外合成甾体激素类药物迅速发展，穿山龙需求量也在迅速增长。据报道， 2002年国际年需求皂素 7000吨，我国年需 3000吨，但年产只有 1000吨，且主要来源盾叶薯蓣黄姜皂素。穿山龙皂素因溶解性好、远优于黄姜皂素，可供出口，市场缺口大、经济效益高。 近年来穿山龙发生一种叶部病害，初步观察认为该病是一种新发生的严重病
14、害，由链格孢属真菌引起，定名为穿山龙黑斑病。本文对辽宁省清原满族自治县采集的穿山龙黑斑病病株叶部组织进行分离纯化，得到一种真菌，根据其形态特点、培养性状、寄主等特 征鉴定为薯蓣链格孢（ Alternaria dioscoreae Vasant Rao） ,进行了人工接种试验，从而确定了薯 蓣链格孢（ Alternaria dioscoreae Vasant Rao）是该病的致病菌。并对薯蓣链格孢 （ Alternaria dioscoreae Vasant Rao）的生物学特性进行了初步研究，其中包括分生孢子萌发和菌落生长与温度、湿度、 pH 值、营养物质关系， 以及分生孢子的致死温度测定。
15、结果表明，分生孢子在 5 -30之间均能萌发，最适温度是 20 -25；在 RH 为86%-100%时均能萌发，最适 RH是 100%；在 pH 为 4-11之间均能萌发，萌发偏酸性，最适pH值为 6；在 1%蔗糖、 1%葡萄糖、 1%D-半乳糖、 1%D(+)-木糖、 1%D-甘露糖、 1%L-(+)树胶醛糖、 1%D-果糖、 CK 中均能萌发，证明了糖分有利于分生孢子的萌发，在 1%蔗糖、 1%D-果糖、 1%D-甘露糖中孢子的萌发率较高；其致死温度为 48；光照条件有利于该菌的生长；该菌在 5 -30中均能生长，最适温度是 25 -30；在查彼果糖培养基、查彼葡萄糖培养基、查彼蔗糖培养基
16、、查彼甘露糖培养基、 PDA与寄主汁液培养基、半 乳糖琼胶培养基、蔗糖琼胶培养基、木糖琼胶培养基、水洋菜培养基、麦芽膏琼胶培养基、玉米叶琼胶培养基、甘露糖琼胶培养基、 PDA均能生长，最适培养基为木糖琼胶培养基、 PDA、查彼葡萄糖培养基、 PDA+寄主汁液培养基、蔗糖琼胶培养基、半乳糖琼胶培养基、甘露糖培养基；在pH值为 4-10 之间均能生长，最适 pH 为 6。 关键词： 穿山龙；黑斑病；薯蓣链格孢 沈阳农业大学毕业论文 (设计 )专用纸 第 2 页 Abstract Byname of Dioscorea nipponica Makion were Chuanshanlong, Dil
17、onggu, Yeshanyao, Chuanlonggu. It belonged to herb medicine plant of yam faculty. It was planted in the province of Liaoning, Jilin,Heilongjiang, Shanxi, Shannxi, and so on. Soap which was effective composition of Dioscorea nipponica Makino was the importance compound material of acesodyne medicine.
18、 For long time in our country the main source of the raw material was Dioscorea nipponica Makino in wild. Because of domestic and international synthesize hormone medicine and the demand of Dioscorea nipponica Makino quickly increased. According to the report, in the year of 2002, international soap
19、 needed 7000t,our country needed 3000t, but the production of year was 1000t,coming from yellow ginger soap of main source shield leaf vegetable. Because the deliquescence of Dioscorea nipponica Makino soap was far better than yellow ginger soap, which can provide export. The market indentation was
20、big. The economic performance was high. Dioscorea nipponica Makino had a serious disease , accidence observing the research that disease was a new occurrence of a kind of leaf department was take placed to harm, It was caused by Alternaria fungi, named black spot disease. This paper referred to sepa
21、rate and sublime black spot disease, collected in Qinyuan Manchu autonomy county of liaoning province. we separated the fungi and get the original fungi of black spot disease, according to characteristics of its appearance, proceeds artificial inoculating experimenting, we made sure the Alternaria d
22、ioscoreae Vasant Rao was nosogenesis. Later we had done some examination, such as temperature, degree of humidity, pH, biology characteristic and so on. In conclusion, the optimum temperature of germination for spore was 20-25 .Among RH6 and RH100,the spore can germinate, The optimum degree of humidity was 100%;the spore at pH 4-11 can germinate, the optimum pH was 6;In 1% canesugar, 1%glucose, 1%D- half lactose, 1%D(+)-wood sugar,1%D-sweet dew sugar,1% D-fructose, CK(water), the spore can germinate, the optimum nourishment was were 1%cane sugar, 1%D-fructose, 1%D-sweet dew. sugar. the
