羊布氏杆菌brucellosis酶联免疫分析.DOC

上传人:天*** 文档编号:601600 上传时间:2018-10-22 格式:DOC 页数:3 大小:103KB
下载 相关 举报
羊布氏杆菌brucellosis酶联免疫分析.DOC_第1页
第1页 / 共3页
羊布氏杆菌brucellosis酶联免疫分析.DOC_第2页
第2页 / 共3页
羊布氏杆菌brucellosis酶联免疫分析.DOC_第3页
第3页 / 共3页
亲,该文档总共3页,全部预览完了,如果喜欢就下载吧!
资源描述

1、羊布氏杆菌(brucellosis )酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。96T使用目的:本试剂盒用于测定羊血清、血浆及相关液体样本中布氏杆菌(brucellosis)表达。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中羊布氏杆菌(brucellosis)表达。用纯化的羊布氏杆菌(brucellosis)抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中布氏杆菌(brucellosis)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与 HRP 标记的布氏杆菌(brucellosis)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝

2、色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值) ,与 CUTOFF 值相比较,从而判定标本中羊 布氏杆菌(brucellosis)的存在与否。试剂盒组成 1 30 倍浓缩洗涤液 20ml1 瓶 7 终止液 6ml1 瓶2 酶标试剂 6ml1 瓶 8 阳性对照 0.5ml1 瓶3 酶标包被板 12 孔8 条 9 阴性对照 0.5ml1 瓶4 样品稀释液 6ml1 瓶 10 说明书 1 份5 显色剂 A 液 6ml1 瓶 11 封板膜 2 张 6 显色剂 B 液 6ml1/瓶 12 密封袋 1 个标本要求 1标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取

3、后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20保存,但应避免反复冻融2不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP )活性。操作步骤1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照1 孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50l。然后在待测样品孔先加样品稀释液 40l,然后再加待测样品 10l。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,3. 温育:用封板膜封板后置 37温育 30 分钟。 4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水

4、 30 倍稀释后备用5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50l,空白孔除外。 7. 温育:操作同 3。8. 洗涤:操作同 5。9. 显色:每孔先加入显色剂 A50l,再加入显色剂 B50l,轻轻震荡混匀,37避光显色15 分钟.10. 终止:每孔加终止液 50l,终止反应(此时蓝色立转黄色) 。11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值) 。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。操作程序总结:计算和结果判定:试验有效性:阳性对照孔平均值1.00; 阴性对照平均

5、值0.10临界值(CUT OFF)计算:临界值= 阴性对照孔平均值 +0.15阴性判定:样品 OD 值 临界值(CUT OFF )者为布氏杆菌(brucellosis)阴性阳性判定:样品 OD 值 临界值(CUT OFF)者为布氏杆菌( brucellosis)阳性。 注意事项1操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。2试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。3浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。4 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5底物请避光保存。6试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为 630nm7所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为 2M 的硫酸,使用时必须注意安全。保存条件及有效期1试剂盒保存:;2-8。2有效期:6 个月

展开阅读全文
相关资源
相关搜索

当前位置:首页 > 重点行业资料库 > 1

Copyright © 2018-2021 Wenke99.com All rights reserved

工信部备案号浙ICP备20026746号-2  

公安局备案号:浙公网安备33038302330469号

本站为C2C交文档易平台,即用户上传的文档直接卖给下载用户,本站只是网络服务中间平台,所有原创文档下载所得归上传人所有,若您发现上传作品侵犯了您的权利,请立刻联系网站客服并提供证据,平台将在3个工作日内予以改正。