Brdu检测细胞增殖实验实验操作:1 铺细胞,每个3.5cm dish 10万个,在37、5%CO2孵箱中培养72h(细胞密度至50-60%左右)。2 Brdu(5-溴-2-脱氧尿苷)加入培养细胞中,1mg/ml,标记48h。(量:Brdu以铺满整个dish底面为准。)3 固定:PBS洗细胞爬片3次,每次5min,在摇床上晃动清洗,4%PFA固定30min。4 变性:将固定好的细胞爬片用PBS洗3次,每次5min,2mol/L的HCl在37条件下变性5min,可放置于37恒温孵箱,应用封口膜把培养皿封好。(120r/m)5 中和:0.1mol/L的硼酸钠(PH8.3)中和10min,PBS洗3次,每次5min。(50r/m)6 加入1ml的0.2%TritonX-100,10min。7 吸出TritonX-100,用PBS洗3次,每次5min。8 加入1ml 3%的BSA封闭,室温1h,可在摇床上晃动。9 吸出BSA,用PBS洗3次,每次5min。10加一抗(尿嘧啶脱氧核苷Brdu(鼠单抗)1:200),用1%BS