RNA提取准备工作及注意事项6页.doc

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资源描述

一、枪头和EP管等的消毒灭菌1、用去离子水配制0.1%(千分之一)的DEPC(剧毒物),须在通风橱中小心使用,避光,密闭4保存;DEPC水是用DEPC(diethypyrocarbonate,焦碳酸二乙酯)处理过并经高温高压消毒的MiliQ纯水。经检测不含 RNase、DNase和proteinase。2、将枪头和EP管放入0.1%的DEPC内,保证枪头和EP管内都充满0.1%的DEP,3、避光、静置、过夜(12-24 h)4、装枪头和EP管的盒子不需要用DEPC浸泡,将枪头或者EP管内的DEPC水大致去除干后,装起,包好5、121摄氏度,30min6、180摄氏度,干燥数个钟头(至少3小时以上)。注意:a、处理DEPC时需要戴乳胶手套、口罩! b、或者不用DEPC消毒,130,90min高压灭菌(许多实验室高温灭菌两次)二、RNA提取注意事项1、组织 RNA 抽提失败的两大现象是: RNA 降解和组织内杂质的残留。关于降解问题,首先看一下为什么从培养细胞中抽提 RNA 不容易降解。现有的 RNA 抽提试剂,都含有快速抑制 Rna

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