DNA浓度和纯度的测定(共5页).doc

DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收，其吸收峰在260nm处。波长为260nm时，DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关，也随构型而有差异。对标准样品来说，浓度为1g / ml时，DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时，dsDNA浓度约为50g / ml ssDNA浓度约为37g / ml RNA浓度约为40g / ml 寡核苷酸浓度约为30g / ml（youyu底物不同有差异）当DNA样品中含有蛋白质、酚或其他小分子污染物时，会影响DNA吸光度的准确测定。一般情况下同时检测同一样品的OD260、OD280和OD230，计算其比值来衡量样品的纯度。经验值：纯DNA：OD260 / OD2801.8 (1.9,表明有RNA污染；1.6，表明有蛋白质、酚等污染） 纯RNA：1.7 OD260 / OD2802.0 （1.7时表明有蛋白质或酚污染；2.0时表明可能有异硫氰酸