EMSA、CHIP.亚细胞定位(共10页).docx

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资源描述

EMSA实验材料:EMSA探针生物素标记试剂盒(20;1358);化学发光EMSA检测试剂盒(100;1399);正电尼龙膜(20;458);细胞核蛋白提取试剂盒(50;462);BCA蛋白浓度测定试剂盒(200;170);压片暗盒(1个;138);PMSF试剂(1g;118)实验方法:一、 探针制备:1. 准备工作:A. 取出TdT Buffer (5X)、Biotin-11-dUTP和Ultrapure water溶解,并置于冰浴上备用。B. 取出待标记的单链EMSA探针,用水稀释至1M,并置于冰浴上备用。如果待标记的EMSA探针为双链,95加热2分钟,然后立即放置到冰水浴中,使双链的EMSA探针转变为单链的探针,然后同样用水稀释至总的单链DNA浓度为1M,即每条单链的浓度为0.5M,相当于最初双链的EMSA探针浓度为0.5M。2. DNA 探针的标记:Ultrapure water29ulTdT Buffer (5X)10ul待标记探针(1M)5ulBiotin-11-dUTP (5M)5ulTdT (

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