folin-酚试剂法测定蛋白质的浓度(共4页).doc

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实验题目 福林(Folin)-酚试剂法测定蛋白质的浓度一【 实验目的】1学会使用福林(Folin)-酚试剂法测定蛋白质的浓度。二【 实验原理】蛋白质或多肽分子中有带酚基酪氨酸或色氨酸,在碱性条件下,可使酚试剂中的磷钼酸化合物还原成蓝色(生成钼蓝和钨蓝化合物)。蓝色的深浅与蛋白质的含量成正比,可用比色法测定三【 实验仪器】1.卵清蛋白片2.7220分光光度计3.试管4.移液管四【实验试剂】1.Folin-酚试剂A:碱性铜溶液 甲液:取Na2CO32g溶于100ml0.1mol/l氢氧化钠溶液中 乙液:取CuSO4.5H2O晶体0.5g,溶于1%酒石酸钾100ml中。临用时按甲:乙=50:1混合使用。2.Folin-酚试剂B:将100g钨酸钠、25g钼酸钠、700ml蒸馏水、50ml85%磷酸继100ml浓盐酸置于1500ml的磨口圆底烧瓶中,充分混匀后,接上磨口冷凝管,回馏10小时,再加入硫酸锂150g,蒸馏水50ml及液溴数滴,开口煮沸15分钟,在通风橱内驱除过量的溴。冷却,稀释至1000ml,过滤,滤

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