hela细胞的培养条件为:高糖DMEM培养基,100ml/l胎牛血清;培养液中一般血清含量为10%传代步骤: 1 倒去细胞培养液(对于小口的培养瓶可采用顷倒方法,对于培养皿,必须用吸管吸出) 2 吸取适量的PBS加入培养瓶中,轻轻振荡后弃去重复一次,以清于血清成分,利于胰酶消化 3 加入适量0.25%胰蛋白酶(一般100mm培养皿可加入1ml,15cm 培养瓶加入5-8滴)转动培养瓶,使其湿润整个细胞房,高温下消化2-3分钟。翻转培养瓶,肉眼观察细胞单层,见细胞单层薄膜出现针孔大小空隙时即可顷去消化液,如消化程度不够可延长消化时间,或置于37C孵箱中加速胰酶作用如见大量细胞片装脱落,已消化过头,则不能顷倒消化液而直接进行下一步操作 4 加入适量培养液终止消化 吸取瓶中培养液反复冲瓶壁上的细胞层,至全部冲下轻轻吹打,混匀,成细胞悬液取样计数,调整细胞浓度为510 /ml 15cm 培养瓶培养时,吸取1ml细胞悬液加到新培养瓶中,加入4ml培养液,盖好,置37C孵箱中培养。 传代的天数要以HELA细胞的生长密度为基础,细胞密度大了就要传