总RNA提取及反转录标准操作流程一、仪器试剂Trizol试剂三氯甲烷（4预冷）异丙醇（4预冷）75%乙醇（DEPC处理水配置）（4预冷）DEPC处理水/RNase free water（反转录试剂盒）无酶EP管200L无酶PCR管冷冻离心机Nano Drop 2000反转录试剂盒（Takara RR036A）二、实验须知1. 选择人员走动较少的实验台或超净台（无须打开风机）操作。2. 操作及观摩人员必须佩戴干净的一次性手套及口罩。3. 尽可能在冰盘上操作。3. 取EP管时需用镊子，不可以用使用过的手套直接取用。取完EP管后，袋子及时封好。4. Trizol含剧毒，若溅到皮肤上，请立即用清水冲洗；若溅到眼内，立即大量清水冲洗，并送医就诊。三、样品处理1. 组织样品将组织在液N中磨成粉末后，再以50-100mg组织加入1ml Trizol溶液，混匀，室温放置5min使其充分裂解。注1：样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%。注2：组织样品收取后应立即处理或液氮冷冻并-80摄氏度保藏。胰腺
