CCK8实验原理与步骤7页.doc

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资源描述

CCK8实验1、在96孔板中配置100l的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(37,5% CO2)。2、向培养板加入10l不同浓度的待测物质。3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。4、向每孔加入10l CCK8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。5、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。6、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。7、若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10l 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。PS:1% w/v SDS溶液配制方法:组份浓度:10% (W/V)SDS配制量:100ml配制方法:1.称量10g高纯度的SDS置于100-200ml烧杯中,加入约80ml的去离子水,68加入溶解2.滴加浓盐酸调节pH值至7.23.将溶液定容至100ml后,室温保存。注意:如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK8之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗

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