DNS法测还原糖和总糖2页.docx

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DNS法测还原糖和总糖一、 配制试剂1. 1mg/mL葡萄糖标准液 预先将分析纯葡萄糖置于80烘箱内约12小时,至恒重。准确称取500mg葡萄糖置于烧杯中,加少量蒸馏水溶解后,转移到500mL容量瓶中,用蒸馏水定容至500mL,混匀,4冰箱中保存备用。若该溶液发生混浊和出现絮状物现象,则应弃之,重新配制。2. 3,5-二硝基水杨酸试剂(DNS试剂)将5.0g 3,5-二硝基水杨酸溶于200ml 2mol/L氢氧化钠溶液中 (注意:在加入氢氧化钠过程中, 不适宜用高温促溶,溶液温度不要超过48),接着加入500mL含130g酒石酸钾钠的溶液,混匀。再加入5g苯酚和5g无水亚硫酸钠,搅拌溶解后,定容至1000ml。储存在棕色瓶中,避光暗处保存备用。(室温下存放7天后可以使用,有效期为6个月)二、 绘制标准曲线将1mg/mL葡萄糖标准液制成浓度为0.5g/L的葡萄糖标准液,分别取标准溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL,补水至1mL,加入DNS 1.5 mL,沸水浴显色5分钟,冷却后补水至10 mL,550nm处测定吸光值,浓度吸光值作标准曲

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