DNS法测定还原糖2页.doc

DNS法测还原糖方法一 原理 DNS即二硝基水杨酸法是利用碱性条件下，二硝基水杨酸（DNS）与还原糖发生氧化还原反应，生成3-氨基-5-硝基水杨酸，该产物在煮沸条件下显棕红色，540nm处有吸收，且在一定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比例关系的原理，用比色法测定还原糖含量的。 二 试剂及方法2.1 试剂 1. 1 mg/ml的葡萄糖溶液2. 3,5二硝基水杨酸 用 400mL 蒸馏水溶解 6.3g3，5二硝基水杨酸，逐步加入 21g 氢氧化钠，再加入182g 四水合酒石酸钾钠、5.0g 苯酚、5.0g 无水亚硫酸钠，温水浴(不超过 48)，不断搅拌，直至溶液清澈透明。用蒸馏水定容至 1000mL，保存在棕色瓶中，与二氧化碳隔绝，静置 57 天后使用，贮存期为 6 个月。2.2 葡萄糖标曲的绘制表1 葡萄糖标曲的绘制方法试剂试管012345葡萄糖标准液(ml)00.10.20.30.40.5蒸馏水(ml)0.50.40.30