一、 一般检测试剂盒或检测试剂从冷藏或冷冻状态拿到室温使用需先在室温下平衡30 60 min，各试剂在使用前充分混匀。酶标仪测定结果，准确性决定于ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质量和软件的算法。二、 操作不当导致1、 加样多、操作持续时间长，尤其是环境温度高时会导致个板孔间反应进程差异；2、 除包被外，都宜采取45加样，且要避免加到侧壁上；3、 加样器不稳定、枪头不均一、试剂溅出、操作习惯不好等造成空间加样量不均一会对结果造成较大影响。4、 孵育时间过长，会导致非特异性反应增强；5、 显色和终止加液时应避免气泡产生，以免影响检测读数；6、 酶标板不宜叠放以减少受热不均，可采取水浴；7、 贴密封膜，防止污物浸入和液体蒸发。8、 Elisa实验用的各试剂都要妥善配置和保存、避免污染，不合格的蒸馏水都可导致空白值或背景值升高。三、 检测样品处理不当引起溶血或污染1、 血清或血浆标本分离不好或发生溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色；2、 待检标本污染
