HPLC色谱方法开发中保留因子k的深度剖析Voyager88医药大世界昨天作者:Luffy前言:保留因子作为化合物在液相上保留最重要的参数,同时它在分离度公式中占据重要的一席,因此理解好保留因子对于液相色谱方法开发具有重要意义,下面小编和大家一起剖析下保留因子k。1. 1.k的定义保留因子(k):固定相中的溶质分子总量(s)除以流动相(m)中的溶质分子总量得到。当化合物在固定相中溶质分子越多,K值越大,保留时间越长。2. k的计算(1)等度洗脱中,运用公式k=(tR-t0)/t0进行计算,其中t0约等于5x10-4Ldc2/F。式中L是色谱柱的长度,以mm为单位;dc是色谱柱的内径,也以mm为单位;F是流动相流速,以ml/min为单位;t0以分钟为单位;其中5x10-4Ldc2为色谱柱的死体积Vm。举例来说,对于4.6mm内径的色谱柱,其死体积Vm近似为0.01L,因此对于一根150x4.6mm的色谱柱,如果使用流速为0.5ml/min,那么t0=Vm/F=1.5/0.5=3分钟;然后根据待测样