PCR反应中基本成分(引物、dNTP、模板等)的作用(共3页).docx

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PCR反应中基本成分(引物、dNTP、模板等)的作用PCR(聚合酶链式反应)反应包括三个基本步骤,即:模板DNA的变性、模板DNA与引物的退火复性、引物的延伸。PCR反应体系包括5种基本成分,依次为:引物、DNA聚合酶、dNTP、模板DNA、Mg2+。PCR()反应包括三个基本步骤,即:模板DNA的变性、模板DNA与引物的退火复性、引物的延伸。PCR反应体系包括5种基本成分,依次为:引物、DNA聚合酶、dNTP、模板DNA、Mg2+。1、引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的链做引物,利用PCR就可将模板 DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶的成串排列。避免引物内部出

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