PCR扩增的原理和操作步骤资料PCR扩增反应的操作第一节 PCR扩增反应的基本原理 一、聚合酶链式反应(PCR)的基本构成 PCR是聚合酶链式反应的简称，指在引物指导下由酶催化的对特定模板(克隆或基因组DNA)的扩增反应，是模拟体内DNA复制过程，在体外特异性扩增DNA片段的一种技术，在分子生物学中有广泛的应用，包括用于DNA作图、DNA测序、分子系统遗传学等。PCR基本原理: 是以单链DNA为模板，4种dNTP为底物，在模板3末端有引物存在的情况下，用酶进行互补链的延伸，多次反复的循环能使微量的模板DNA得到极大程度的扩增。在微量离心管中，加入与待扩增的DNA片段两端已知序列分别互补的两个引物、适量的缓冲液、微量的2+DNA膜板、四种dNTP溶液、耐热Taq DNA聚合酶、Mg等。反应时先将上述溶液加热，使模板DNA在高温下变性，双链解开为单链状态;然后降低溶液温度，使合成引物在低温下与其靶序列配对，形成部分双链，称为退火;再将温度升至合适温度，在Taq DNA聚合酶的催化下，以dNTP为原料，引物沿5?3方向延伸，形成新的DNA片段，该片段又可作为
