3 Western blot3.1 试剂配制1)30%聚丙烯酰胺储备液(Acr/Bis):丙烯酰胺(Acr),29g;N,N-亚甲基双丙烯酰胺(Bis),1g,去离子水溶解,37水浴助溶,定容至100mL。0.45m滤器过滤,棕色瓶4避光保存。2)10%十二烷基硫酸钠(SDS):SDS,10g;H2O,80mL。68加热溶解,浓HCl调pH至7.2,定容至100mL,室温保存。3)10%过硫酸铵(AP):AP,1g;H2O,10mL。避光,4保存。(42周)4)分离胶缓冲液(1.5MTris-HCl pH8.8):Tris,18.17g;H2O 80mL。用浓HCl调pH至8.8,定容至100mL,4保存。5) 浓缩胶缓冲液(1.0MTris-HCl pH6.8):Tris,12.11g;H2O 80mL。用浓HCl调pH至6.8,定容至100mL,4保存。6) 电泳缓冲液(10):甘氨酸(Glycine),188g;Tris 30.2g;SDS,10g;H2O,800mL。调节pH至8.3,定容至1L,4保存(用