克隆载体表达载体构建详细版(共5页).docx

1、 稀释引物1、4，15min、13000转离心（先等离心机降温）2、 根据OD值加DD水。3、 静置30min（冰上）4、 准备1.5毫升EP管，并加90ulDD水。5、 向EP管中加10ul引物，震荡离心，-20保存。2、 跑MIX检测引物（20ul体系）、上引物 0.8ul下引物 0.8ulMix 10ulDNA（日本晴） 1ulDD水 7.4ul三 跑高保真酶（50ul体系）DNAorCDNA 2ul上引物 2ul下引物 2ul5*buffer 10ul dNTPs 5ulDD水 28ulPfu（最后加） 1ul四 胶回收流程1、 在紫外线下切胶，用牙签装入2ml的EP管中。2、 按量加XP2，放在55水浴锅中10min，每2min摇匀1次，涡旋，短离。3、 将液体冷却到室温，转移到