（一）筛选结果鉴定：（1）基因组DNA提取PCR鉴定外源基因（2）SHG-44-重组pcDNA3阳性细胞、SHG-44-vect裂解聚丙烯酰胺凝胶电泳免疫印迹鉴定P16蛋白表达（Western-blot）。（3）测定外源性基因对SHG-44细胞增殖的影响流式细胞仪分析：SHG-44、SHG-44-vect、SHG-44-重组pcDNA3单细胞悬液70%酒精固定裂解细胞核糖核酸酶消化碘化丙啶染色上机分析G1期和G2/M、S期比例。细胞生长曲线测定：SHG-44、SHG-44-vect、SHG-44-重组pcDNA35104/孔接种24孔培养板24hr后各自用苔盼蓝染色计数细胞计算细胞生长抑制百分率。软琼脂克隆形成率分析：SHG-44、SHG-44-vect、SHG-44-重组pcDNA3104 细胞0.3%低熔点琼脂糖培养1-2周后计数不可少于50个细胞的克隆数计算克隆形成率抑制率。三、注意事项1、 优化转染条件（脂质体的用量、DNA密度、细胞密度、脂质体和DNA混合孵育时间）每种细胞和质粒均须进行。用于转
