木聚糖酶活力测定.docx

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木聚糖酶活力测定原理:木聚糖是植物半纤维素的主要成分,为自然界中广泛存在、含量仅次于纤维素的可再生多糖资源,占细胞干重的7一35。木聚糖酶是一类可将木聚糖降解成低聚糖和木糖的复合酶系。它以内切方式降解木聚糖主链架的-l,4-木糖苷键,其水解产物主要是木二糖和木寡糖,少量的木糖和阿拉伯糖。木聚糖酶水解木聚糖底物生成的还原性糖,可在煮沸条件下与DNS显色剂生成棕红色的氨基化合物。在一定范围内,还原糖的生成量与反应液的颜色强度成正比。因此可通过测定棕红色的氨基化合物540nm波长下吸光度来测定木聚糖酶活力。试剂:DNS溶液:酒石酸钾钠182 g,溶于500mL蒸馏水中,加热,于热溶液中依次加入3,5-二硝基水杨酸6.3 g,NaOH 21g,苯酚5 g,搅拌至全溶,冷却后用蒸馏水定容至1000 mL,贮于棕色瓶中,室温保存.1mg/mL木糖标准溶液:无水木糖于80 C烘至恒重,称取0.1 g于烧杯中,加适量蒸馏水溶解,转入容量瓶中并定容至100 mL。方法:标准曲线的绘制:取6支20mL的试管按下表顺序依次加入各试剂试剂(单位:mL)试管号

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