核酸含量的测定紫外吸收法 原理核苷、核苷酸、核酸的组成成分中都有嘌呤、嘧啶碱基，这些碱基都具有共轭双键 （ -C-C=C-C=C-），在紫外光区的250-280nm处有强烈的光吸收作用，最大吸收值在260nm左右。常利用核酸的紫外吸收性进行核酸的定量测定。核酸的摩尔消光系数(P)表示为每升溶液中含有1摩尔原子磷的光吸收值。RNA的(P)260nm（pH7.0）为7 7007 800，RNA的含磷量约9.5%，因此每毫升溶液含1g RNA的光吸收值相当于0.0220.024。小牛胸腺DNA钠盐的(P) 260nm（pH7.0）为6 600，含磷量为9.2%，因此每毫升溶液含1g DNA钠盐的光吸收值相当于0.020。测出260nm处的光吸收值，可计算出核酸的含量。当核酸变性降解时，其紫外吸收强度显著增加，称为增色效应。 蛋白质也有紫外吸收，通常蛋白质的吸收高峰在280nm波长处，在260nm处的吸收值仅为核酸的1/10或更低，因此对于含有微量蛋白质的核酸样品，测定误差较小。若待测的核酸制品中混有大量的具有紫外吸收的杂质，则测定
