蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量一. 实验原理糖类在较高温度下可被浓硫酸作用而脱水生成糠醛或羟甲基糖醛后,与蒽酮(C14H10O)脱水缩合,形成糠醛的衍生物呈蓝绿色。该物质在620 nm处有最大吸收,在150 g/mL范围内,其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。该法有很高的灵敏度,糖含量在30 g左右就能进行测定。二. 试剂器材蒽酮试剂:精密称取0.1g蒽酮,加80%浓H2SO4100 mL使溶解,摇匀。当日配制使用;葡萄糖标准液:将无水葡萄糖置于五氧化二磷干燥器中,12hr后精密称取100mg,用蒸馏水定容至100ml;其他器材:分析天平、分光光度计、容量瓶(100ml、50ml、10ml)、烧杯、具塞试管、移液器、移液器吸头、涡旋振荡器和废液缸等。三. 操作步骤葡萄糖标准曲线的制作取7支具塞试管,按下表数据精密配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液,每个浓度做2-3个重复: 管号0123456标准葡萄糖溶液/mL00.20.40.60.81.01.2蒸馏水/mL2.01.8