蛋白质的分离纯化(共7页).docx

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蛋白质的分离纯化方法蛋白质的分离纯化主要包括“前处理”,“粗分级”,“细分级”三个步骤,本文主要讲述“细分级”,即粗提的蛋白质分离纯化的方法。蛋白质的分离纯化方法根据蛋白质不同的生理特性有不同的方法分类,主要根据以下几个性质来设计纯化方法:一、 根据分子大小不同分离纯化:蛋白质是一种大分子物质,并且不同蛋白质的分子大小不同,因此可以利用一些较简单的方法使蛋白质和小分子物质分开,并使蛋白质混合物也得到分离。根据蛋白质分子大小不同进行分离的方法主要有透析、超滤、离心和凝胶过滤等。1、透析和渗滤:主要利用半透膜透析是将待分离的混合物放入半透膜制成的透析袋中,再浸入透析液进行分离。超滤是利用离心力或压力强行使水和其它小分子通过半透膜,而蛋白质被截留在半透膜上的过程。这两种方法都可以将蛋白质大分子与以无机盐为主的小分子分开。它们经常和盐析、盐溶方法联合使用,在进行盐析或盐溶后可以利用这两种方法除去引入的无机盐。由于超滤过程中,滤膜表面容易被吸附的蛋白质堵塞,以致超滤速度减慢,截流物质的分子量也越来越小。所以在使用超滤方法时要选择合适的滤膜,也可以选择切向流过滤得到

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