神经元原代培养一、准备1. 试剂1)胎牛血清灭活:血清室温自然融解,摇匀。选用与血清瓶同规格的对照瓶一个,并加入与血清等体积的水。对照瓶内插入12支温度计(保证测试温度的准确性)。将血清瓶与对照瓶同时放入恒温水浴箱,待温度计所示温度上升至56时,定时30分钟。灭活后分装,10ml/瓶,一瓶放在培养箱做无菌实验,其余-20-70保存。2)D-Hanks液(g/L):NaCl: 8, KCl: 0.4, KH2PO4: 0.06, Na2HPO42H2O: 0.06, NaHCO3: 0.35; 酚红: 0.02,超纯水溶解,调节PH至7.2,高压灭菌(购自南方医院临床试验中心)。3)多聚赖氨酸:避光,用超纯水配制好后过滤,200l或400l/tube分装, -20度储存。 母液浓度为5mg/ml,工作液浓度为0.1mg/ml(购自Sigma,P2636,100mg)。配置方法:20ml超纯水溶解,分装为1ml/管。用时加入49ml超纯水稀释为0.1mg/ml的工作液。4)50mM谷氨酸:超纯水溶解,滤过除菌,分装50l/tube,-20保存