一、脲酶测定(比色法)脲酶是对尿素转化起关键作用的酶,它的酶促反应产物是可供植物利用的氮源,它的活性可以用来表示土壤供氮能力。1、试剂配制:(1) pH6.7柠檬酸盐溶液:取368g柠檬酸溶于600mL蒸馏水中,另取295g氢氧化钾溶于水,再将两种溶液合并,用1N氢氧化钠将pH调至6.7,并用水稀释至2L。(2) 苯酚钠溶液:称取62.5g苯酚溶于少量乙醇中,加2mL甲醇和18.5mL丙酮,后用乙醇稀释至100mL(A液),保存再冰箱中。称取27g氢氧化钠溶于100mL水中(B液),保存于冰箱中。使用前,取A、B两液各20mL混和,并用蒸馏水稀释至100mL备用。(3) 次氯酸钠溶液:用水稀释制剂至活性氯的浓度为0.9,溶液稳定。(4) 10尿素溶液:10g尿素溶于100mL水中。(5) N的标准溶液:精确称取0.4717g硫酸铵溶于水稀释至1L,则得1mL含0.1mgN的标液,再将此液稀释10倍制成氮工作液(0.01mg/mL)。2、操作步骤称取5土置于50mL容量瓶中,加1mL甲苯处理,加塞塞紧轻摇15;往瓶中加入5mL10%尿素