单克隆抗体的制备流程4页.doc

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单克隆抗体的制备流程(一)动物的选择与免疫1动物的选择 纯种BALB/C小鼠,较温顺,离窝的活动范围小,体弱,食量及排污较小,一般环境洁净的实验室均能饲养成活。目前开展杂交瘤技术的实验室多选用纯种BALA/C小鼠。2 免疫方案 选择合适的免疫方案对于细胞融合杂交的成功,获得高质量的McAb至关重要。一般在融合前两个月左右根据确立免疫方案开始初次免疫,免疫方案应根据抗原的特性不同而定。(1)可溶性抗原免疫原性较弱,一般要加佐剂,半抗原应先制备免疫原,再加佐剂。常用佐剂:福氏完全佐剂、福氏不完全佐剂。初次免疫抗原150g加福氏完全佐剂皮下多点注射或脾内注射(一般0.81ml,0.2ml/点)3周后第二次免疫剂量同上,加福氏不完全佐剂皮下或ip(腹腔内注射)(ip剂量不宜超过0.5ml)3周后第三次免疫剂量同一,不加佐剂,ip(57天后采血测其效价)23周加强免疫,剂量50500g为宜,ip或iv(静脉内注射)3天后取脾融合目前,用于可溶性抗原(特别是一些弱抗原)的免疫方案也不断有

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