反转录PCR-步骤和方法4页.docx

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反转录PCR科技名词定义中文名称:反转录PCR 英文名称:reverse transcription PCR;RT-PCR 定义:扩增mRNA的一种实验技术。先将mRNA反转录成cDNA,然后再以cDNA为模板,用PCR方法加以扩增。 应用学科:遗传学(一级学科);基因组学(二级学科) 以上内容由全国科学技术名词审定委员会审定公布 目录一、反转录酶的选择 二、合成cDNA引物的选择 三、操作步骤 四、注意事项RT-PCR反应原理1反转录PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)又称为逆转录PCR。其原理是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。RT-PCR使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级,使一些极为微量RNA样品分析成为可能。该技术主要用于:分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDN

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