1、标本采集的基本知识1 病人的准备做血液检验项目检验的病人，一般要求采血前禁食 1214 小时，采血的前一天避免吃高脂肪、高蛋白类食物，避免饮酒。饮酒后血中乳酸、尿酸盐、乙醛、乙酸盐增加。长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇升高，平均红细胞体积增大，谷氨酰转肽酶亦较不饮酒者为高。甚至可将这三项作为嗜酒者的筛查。进行葡萄糖耐量试验的病人，在试验前 3 天给予适量的碳水化学物饮食，有利于取得正确的结果；做 I131 吸收试验者，在试验前一个月停服一切含碘的药物和含碘丰富的食物，如海产品类。强烈肌肉运动可明显影响体内代谢。短暂的变化是血清非酯化脂肪酸迅速下降，继而渐渐上升而恢复；丙酮酸可因运动而增加达到 18
2、0%，而乳酸则可增至 300%。受到持续性影响的主要是一些与肌肉有关的酶，如肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)等。 CK 的峰值在 11 小时后可达运动前的一倍，持续 60 小时之后才恢复至原水平，故一般主张清晨取血。采血前 15 分钟宜休息，不可作过大的运动。药物：药物对临床化学分析的影响主要有两个方面：(1)对分析方法的影响，药物本身或它的代谢产物可能对化学测定的任何步骤产生干扰。干扰可以由于药物的物理性质，如药物本身有色或能发出荧光；或由于它的化学性质，如强还原性，与蛋白质结合及对酶的抑制等。(2)药物可以通过它的药理作用及毒理作用改变系列参数。在采集标本前，暂停各种药物是上策，如某
3、种药不可停用，则应了解可能对检验结果所产生的影响。作为调查参考值的对象，最好选择不服任何药物者。药物对血、尿等成分的影响是一个十分复杂的问题。一些药物可使体内某物质发生变化，例如 ACTH、胆盐、氯丙嗪可使胆固醇浓度升高；肝素及甲状腺素使血中胆固醇降低。药物也可以干扰测定中化学反应。后者又随方法不同而异即使同一药物由于所用测试方法不同，也可引起“正”“负”两种相反的变化。例如抗坏血酸可干扰 Trinder 反应，使酶法测定葡萄糖、胆固醇、甘油三脂及用 JG 法测定血清胆红素比真值低，而抗坏血酸可使尿糖酶法测定结果偏低。应用大剂量青霉素可使血中 AST、CK、肌酐、总蛋白升高；白蛋白、胆红素降低
4、。因此为了得到正确结果，必须事先停服某种药物。临床医师在选择与解释结果时，必须考虑药物的影响。体位：体位影响血液、体液循环，由于血浆和组织间液因体位不同而平衡改变，以细胞成分和大分子物质的改变较为明显，例如由卧位改为立位，血浆蛋白质、酶、钙、胆红素、胆固醇及甘油三脂可因此浓度增大；血红蛋白、红细胞比积、红细胞计数亦增加。以上为病人准备的基本影响因素，如措施不当，注意不够，常可引入误差而难以发现，结果是病人花了钱，却得不到预期的结果，甚至延误病情诊疗。总之，在日常工作中，我们建议清晨空腹采血，是基于以上几个方面的考虑。另外，在临床检验中，基于光化学比色法的临床生化测试，要求血液标本新鲜，及时送检
5、，并且血清无溶血、无血脂混浊。另一方面，虽然现在临床免疫分析中普遍采用特异性高的 ELISA 法，但同样必须除外来自血液标本本身的非特异性干扰。只有这样，得出的测试结果才比较可靠，具有较高的辅助诊断价值。2 采血时间时间对人的影响可分为线性和周期性两种。线性因素主要是年龄影响，青春期和老年期不同阶段，实验室指标亦不同。新生儿的胆红素水平较高，儿童的碱性磷酸酶含量大约是成人的 2 倍；随着年龄增长，胆固醇和低密度脂蛋白含量逐渐增加。周期性影响主要指昼夜节律和女性的月经周期等。例如，血红蛋白在 6 点18点较高，而在 22 点24 点最低，变化幅度可达 815%。血液生化检验一般要求早晨空腹安静时
6、采血。因为体内的各种化学成份受许多因素调节：如饮食后大量葡萄糖及脂类物质吸收入血，使血糖和血脂上升，游离脂肪酸及无机磷降低；运动后会使乳酸、丙酮酸、乳酸脱氢酶、转氨酶、肌酸激酶等升高，血糖降低；昼夜变化大的成份有皮质醇、血清铁、胆红素等；日间变化大的主要是代谢废物成份如尿素、尿酸等；大量饮水可致血液稀释等等。所以，做血液生化检验时应掌握好采血时间。但是，对重症昏迷或急症病例，可随时采血送检糖、钾、钠、钙、血气分析、淀粉酶等项目。但在输液时采血应避免送检项目受输液成份的影响，如在补钾、补糖、补碱等情况下抽血送检，则对血钾、血糖、二氧化碳结合力等项目均有影响。一般血液生化检验要求病人晚餐后禁食，至
7、次日晨采血，空腹约 1214 小时。早晨空腹采血可以避免饮食的影响，因为基于正常健康人群调查而建立的“正常值”(或称 “参考范围”) 都是在特定条件下进行的。为了解有昼夜节律性变动的指标，应定时采血，但过度空腹达 24 小时以上，某些检验会有异常结果。例如血清胆红素可因空腹 48 小时而增加 240%，血糖可因空腹过长而减少为低血糖；血脂空腹过度，甘油三酯、甘油、游离脂肪酸会有增加，而胆固醇无明显变化。除了急诊或其它特殊情况外，一般主张在禁食 12 小时以后空腹采血，进餐后血浆脂肪、蛋白质、糖类会有所增加。在高脂餐后 24 小时采血，多数人碱性磷酸酶含量增高，主要来自肠源性同工酶。一般认为高蛋
8、白质饮食使血浆尿素、血氨和尿酸增加，尿总氮排出增多，但不影响肌酐含量；富含嘌呤的饮食可以使血及尿中尿酸增高；高比例不饱和脂肪酸食物可减低胆固醇含量。以上种种情况说明在作某些检验时，应对食物有一定的控制。3 采血部位成人一般取肘部静脉，肥胖者可用腕背静脉；婴儿常用颈部静脉、股动脉或前囟静脉窦；刚出生的婴儿可收集脐带血；尸体解剖者取心脏血；血气分析一般采动脉血；检验只需微量全血时，成人从耳垂或指尖取血，婴儿从大脚趾或脚跟取血。输液病人采血应避免在输液的同一侧上肢或下肢采血。采血部位不当，这是临床常见的采血问题。输液病人在不能停止输液的情况下静脉采血一定要注意远端原则。也就是说要在对侧手静脉采血。如
9、同时两只手都在输液，可以采脚端。实在不行也可以在滴注位置的上游采血。由于指尖血是末梢血，因此没什么影响。由于临床常用手部输液，而静脉是从远端向心脏回流，所以同侧的肘静脉总是在滴注位置的下游，因此同侧采血都有问题。至于影响的大小与输注液体、输注方式以及待测项目有关。烧伤患者采血应避免穿剌炎症或水肿部位，以免影响结果。4 采血操作及送检的注意事项41 采血器械：采血用的注射器、试管必须干燥清洁。注射器及针头不宜用酒精消毒。目前多用一次性注射器及真空负压采血管。42 采血操作：必须按无菌操作，采血部位皮肤必须干燥，止血带不可缚扎过久，抽血时速度不可过快，以免血细胞破裂，采血后应卸下针头再将血液沿管壁
10、徐徐注入试管内。43 防止气体逸散：采集血气分析样本，抽血时注射器内不能有空泡，抽出后立即用小橡皮密封针头，隔绝空气。因空气中的氧分压高于动脉血，二氧化碳分压低于动脉血；作二氧化碳结合力测定时，盛血标本的容器亦应加塞盖紧，避免血液与空气接触过久，影响检验结果。44 防止分解及自身变化：采血后应尽快送检。因血液中有些化学成份于离体后极易分解，使其含量改变，如血糖及酶类测定，时间过久，血细胞酵解可使血糖下降，酶活力变化等。有些化学成份在细胞内外相差悬殊，离体时间过长，细胞内外浓度会发生变化，影响测定结果。如肌酸激酶、乳酸脱氢酶、电解质等。45 防止污染：有些检查项目要求极严格，其采血器具及标本容器
11、必须经过化学清洁。如血氨、铜、锌、铁等项目，因其含量极低，稍有污染即影响结果。作淀粉酶测定时，要防止唾液污染，因唾液中含有大量的淀粉酶，污染后会引起假性淀粉酶升高。46 防止溶血：作各类生化检验，要防止血细胞破裂溶血，因溶血引起细胞内外浓度改变，可使钾、胆红素、氯化物、无机磷、ALT、AST、LDH 等升高，钠、钙、AKP 等降低，溶血对某些实验的反应过程干扰：如血红蛋白可直接抑制脂肪酶的活性，使脂肪酶降低。溶血可影响呈色反应终点为红色的实验，如酶法测定血糖、胆固醇、甘油三酯、胆红素的重氮反应、尿素的二乙酰肟法等。5 抗凝剂的选择生化检验大部份项目都采用血清，但有些项目需用血浆或全血，采集的血
12、液必须加入抗凝剂。抗凝剂的种类较多，如选择不当，亦会影响检验结果的准确性。下面介绍几种生化检验常用的抗凝剂及其用途：51 草酸钾：常用于尿素、肌酐、纤维蛋白原等测定，不能用于钾、钙及血气分析等项目的测定；同时对 LDH、丙酮酸激酶、AKP 、ACP 和淀粉酶均有抑制作用。52 肝素：具有抗凝力强，不影响血细胞体积，不易溶血等优点，常用于电解质、血气分析、血氨等多种生化常规项目的测定，是生化检验项目中最常用的一种抗凝剂。53 氟化钠：氟离子能结合钙而抗凝，但抗凝效果较弱，数小时后又可出现凝固，故常用氟化钠与草酸钾组成混合抗凝剂来作为血糖测定的抗凝剂，它可抑制血细胞葡萄糖酵解酶的作用，延长标本的保
13、存时间。但氟化钠对许多酶活性有抑制作用，故不适合酶的测定，对酶法测定的胆固醇和脲酶法测定尿素也有干扰。54 乙二胺四乙酸钠盐（EDTA-Na 2）：生化常用的抗凝剂，但不能用于钙、钠、及含氮物质的测定，对淀粉酶、肌酸激酶、AKP、ACP 、5-核苷酸酶等可抑制，对丙酮酸激酶有明显升高的作用。标本采集注意事项随着检验方法日益完善，高精档次的自动化仪器的大量应用，以及检验的科学管理和检验工作人员技术水平不断提高，明显降低检测过程中的影响因素和干扰，而分析检测前的各类影响或干扰因素相对增多。现代检验医学对检测标本的留取与收集提出较高的要求，而广大就诊患者也必需了解留取标本的基本知识，遵照嘱托，配合检
14、验人员，以使检验结果更准确可靠。临床检验常见的标本一般包括血液(指血、静脉血)、尿液、粪便、脑脊液、胸水、腹水、前列腺液、精液、阴道分泌物等，这些标本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。一、血液标本尽量避免生理因素的影响，有些生理因素，如吸烟、进食、运动、情绪波动、妊娠、体位等均可影响血液中某些成分的变化，有些甚至还有昼夜变化。采集血液标本的条件应尽量一致为宜，如无法避免，应说明在标本上注明该因素。1外周血 一般选取左手无名指内侧采血，该部位应无冻疮，炎症，水肿，破损。如该部位不符合要求，以其他手指部位代替。对烧伤病人，可选择皮肤完整处采血。由于部分血液常规检测(如白细胞计数、分类等)受生理
15、因素影响波动过大，比较时宜条件尽量一致。出、凝血功能的检测项目(如血小板计数，出血时间或凝血时间等)的检测，不宜服用抗凝、促凝药物，以免影响测定结果。 2. 静脉血 除涉及各种止血和血栓检测等项目需采用抗凝静脉血血浆外，目前绝大多数检测项目的分析检测可直接采用静脉血的血清。在血清检测项目中，有些(如血糖、血脂等)受饮食及昼夜因素影响较大，一般以清晨空腹血标本为宜，有些在血中衰变较快(血清酶活性测定如 ACP 活性等)，04贮存活性减弱也不一，这些项目的检测必须及时而快速，有些(如肌酸激酶等)受运动等因素影响较大。抽血时避免溶血的发生也十分重要，尤其涉及血钾、无机磷、LDH 等的测定。采血部位不
16、当。这是临床常见的采血问题。输液病人在不能停输的情况下静脉采血一定要注意远端原则。也就是说输液病人要在对侧手静脉采血。如两只手同时都在输液，可以采脚端。实在不行也可以在滴注位置的上游采血。由于指尖血是末梢血，因此没什么影响。由于临床常用手部输液，而静脉是从远端向心脏回流，所以同侧的肘静脉总是滴注位置的下游，因此同侧采血都有问题。至于影响的大小则与输注液体、输注方式以及待测项目有关。因此切忌在输液的同侧静脉抽血做各项检验。 如需同时抽取几个项目的血标本，一般应先注入干燥试管，其次注入血培养瓶，最后注入抗凝管，动作要准确迅速。抗凝管及血培养瓶需轻柔地颠倒混匀数次！3. 动脉血（常用作血气分析）采血
17、部位多选用桡动脉、肱动脉、股动脉。动脉痉挛易产生气泡和溶血。取血器要清洁密封并行抗凝预处理。采取肢动脉血时务必考虑该肢体端有无骨折等严重创伤。伤肢远端血气结果不能代表患者实际情况。用 2ml 注射器，连接 7 号针头（针头过小可引起血肿），吸 1：500 肝素生理盐水溶液 1ml，将活塞来回抽动，使内壁沾匀肝素，再推掉全部肝素溶液，将活塞推至空筒顶端后不再回拉，以保持注射器内无空气。选择动脉（桡动脉采血比较方便），常规消毒病人的皮肤及操作者的左手食、中指后，以左手绷紧皮肤，右手持注射器，用左手食指触摸动脉搏动处，以 45 度角进针，见血液自动加入空筒内至 2ml 后拔出针头，嘱病人按压局部 5
18、 分钟，应立即用橡皮泥或橡皮塞封闭针头（针头斜面埋入橡皮中即可），以隔绝空气，在手中搓动注射器，使血与肝素混合，血标本应立即放入含有氯化钠冰水的容器中，使标本迅速冷至 4 摄氏度以下，立即送检。采血后立即密封，送检要及时，因血液离体后细胞仍进行代谢，会使 pH 及 PO2 下降， PCO2 升高。一般而言从采集标本到完成测定，期间不超过 30 分钟，大体上不会对临床诊断造成太大影响。注意：肝素会严重影响凝血功能的测定，故严禁将抽取的血气分析标本注入蓝帽子的凝血功能真空管内。应分两次抽血送检，以免因标本不合格而延误病情。二、尿液标本同血标本一样，尿液标本受饮食、运动、药物量等因素的影响也较大，特
19、别是饮食的影响，故一般来说晨尿优于随机尿。晨尿是指清晨起床后的第一次尿标本，较浓缩和酸化，有形成分(如血细胞，上皮细胞，管形)相对集中便于观察。随机尿即随意一次尿，留取方便，但受饮食、运动、药物影响较甚，易于出现假阳性和假阴性结果，如饮食性蛋白尿、饮食性糖尿、维生素 C 干扰潜血结果等。餐后尿(午餐后 2 小时收集的患者尿液)适用于尿糖，尿蛋白和尿胆原的检查，此时的尿标本可增加试验敏感性，检出较轻微的病变。12 小时尿细胞计数，即 Addis (前晚 8 时排空膀胱后留取至次日 8 时的所有尿液)，因时间较长，细菌易繁殖，须加入防腐剂甲醛。24 小时尿(第一天晨 6 时排空膀胱后留取至次日晨
20、6 时的所有尿液)中化学物质的定量，包括蛋白、糖、钙等，检测不同的物质，应选择不同的防腐剂防腐。清洁中段尿多用于尿细菌培养，要求无菌，冲洗外阴后留取标本。所有尿标本的收集都应足量，最少 12m1，最好 50ml，定时尿须全部收集，对女性患者应避免阴道分泌物、经血污染尿标本。三、粪便标本粪便标本的检测对判断消化系统疾病有重要参考价值。采集时要求用干净的竹签选取含有粘液、脓血等异常病变成分的粪便，对外观无异常的粪便须从表面、深处等多处取材。找寄生虫虫体及作虫卵计数应收集 24 小时粪便。查痢疾阿米巴滋养体应于排便后立即检查，从有脓血和稀软处取材，保温送检。 查日本血吸虫虫卵时应取粘液、脓血部分，孵
21、化毛蚴时至少留取 30g 粪便，且需尽快处理。检查蛲虫卵须用透明薄膜拭子于晚 12 时或清晨排便前自肛门周围皱襞处拭取并立即镜检。不宜用棉签蘸取粪便送检。留取标本后需及时送检，以免粪便过于干燥以致无法检验。隐血试验(化学法) ，试验前 3 日禁食肉类及含动物血食物并禁服铁剂、维生素C 等。所有粪便标本采集后 1 小时内应检查完毕，以防止有形成分受消化酶及 pH的破坏。四、脑脊液标本脑脊液标本采集后应立即送检，放置过久将影响检验结果：如细胞变性、破坏、或纤维蛋白凝集成块，导致细胞分布不均而使计数和分类不准确。有些化学物质如葡萄糖等将分解使含量减少细菌发生自溶，影响细菌（尤其是脑膜炎球菌）的检出率
22、。脑脊液抽取后一般分装三个无菌管，第一管作细菌培养，第二管作化学分析和免疫学检查，第三管作一般性状及显微镜检查。三管顺序不宜颠倒，否则可出现前后几次脑脊液常规结果的较大偏差，这也是我院临床上常出现的错误原因之一。因标本采集较难，故送检和检测的过程应注意安全。五、胸腹水标本与脑脊液标本一样，采集后的标本注意安全，及时送检。一般也分装三管，第一管细菌培养，第二管生化检查，第三管作常规细胞学检查，顺序以与脑脊液相同为宜。生化检测管应用肝素钠抗凝，否则纤维蛋白析出造成总蛋白结果偏低且有可能引起生化仪加样针的堵塞。六、前列腺液标本前列腺液标本由前列腺按摩后采集，液量少时直接滴在载玻片上及时送检，须注意防
23、止标本蒸干，量多时收集在洁净干燥的试管中。若按摩不出前列腺液，可检查按摩后的尿液沉渣。七、精液标本精液标本采集前应禁欲 37 天，排净尿液后可用手淫法或其他方法将精液全部直接排入干净的容器中，保温并及时送检。由于精子生成日间变动较大，一般应检查 23 次(每次间隔 12 周)方可做出诊断。八、阴道分泌物标本阴道分泌物标本采集前 24 小时应禁止房事、盆浴、阴道检查、阴道灌洗及局部上药等取材所用器械需要清洁。一般用盐水浸湿棉拭子自阴道或阴道穹隆后部、宫颈管口取材，制生理盐水涂片后观察分泌物标本，经期的女性患者不宜检查阴道分泌物标本。各种检验标本的正确采集方法 1标本送检须知 检验标本包括血液标本
24、和其他各种体液标本。检验标本的采集是保证检验结果准确的前堤。因此，要求各临床科室医护人员、送检单位及相关人员认真阅读本文件并严格按以下方法操作。1 尿液标本的留取 尿常规检查标本 1.1 使用清洁干燥容器，住院病人以清晨第一次尿为主，门、急诊患者可随时留取新鲜尿液 约 20ml 送检。 1.2 尿标本应避免经血、白带、精液、粪便等混入。 1.3 标本留取后及时送检，不得超过 1 小时，以免细菌在尿中生长繁殖，菌体蛋白与病理性 蛋白尿相互干扰；以免尿素酵解、葡萄糖降解、尿 pH 升高；以免有形成份破坏(细胞管型 分解、红细胞溶解)，化学成分变性、分解，尿中盐类析出结晶）。 尿培养标本 1.4 需
25、留取清洁中断尿，注意无菌操作，避免污染。 1.5 病人先清洗外阴部，自行排尿，排尿过程中尿液不要中断，前段尿不要，用无菌管接中断尿，塞好瓶塞后立即送检。 1.6 患者应停用抗生素三天后作尿培养检查。 1.7 尿中应加防腐剂。 24 小时尿标本 1.8 准备清洁干燥带盖的广口容器，容量为 30005000mL。 1.9 病人于晨 7 时将尿全部排尽弃去，然后开始留尿，将 24 小时内历次所排尿液均留于容器中，包括次日晨 7 时所排最后一次尿。 2.0 测量尿液总量(ml 数)并记录在化验单上，将全部尿液充分混均后，取出 2050m1，置于清洁干燥有盖容器总立即总检。 2.1 若天气炎热，可根据检
26、验要求放入适量的防腐剂。 甲 苯：适用量 20ml1000ml 尿，用于尿液生化检验(G 、Pr、Ca、P、Cr 等) 40甲醛：适用量 12ml24h 尿，用于细胞、管型等有形成分检查。 应在第一次尿液倒入后再加防腐剂。 2.2 24h 尿中不能混入异物。 12h 尿标本 留取 12h 尿标本，可以从晚上 7 时开始至次晨 7 时止(具体方法同 24h 尿标本采集)。 2 粪便标本的留取 粪便常规检查标本 2.1 粪便检验应取新鲜标本，容器要清洁，及时送检，于 1h 内检查完毕。 2.2 采集标本时应用干净竹签选取含有粘液、脓血等病变成分的粪便，外观无异常的粪便须 从表面、深处及粪端多处取材，其量至少为指头大小。 2.3 粪便标本中不可混有尿液、消毒剂、污水、植物、泥土等。
