1、荧光成像简要操作步骤1. 测定前请先仔细阅读说明书。2. 按照说明书,将所有连线正确连接 CCD 相机与主控单元之间的 Camera 线。 MINI HEAD 与主控单元之间的 MINIHEAD 线。CCD 相机与 PC 机之间的 1394 火线,另一端接 计算机。主控单元与 PC 机之间的 USB 连线。主控单元与电池充电器之间的充电连线,另一端接电源。3. 打开主机和电源开关。4. 电脑上双击运行 imagingWin.exe ,选择对应的“com”口。5. 在弹出的对话框中选择探头类型(mini)、选择颜色(blue)。6. 将被测材料放置好。7. 添加兴趣点(在窗口右侧的 AOI 区域
2、,先单击 Add,然后在叶片相应区域单击选定)可添加多个兴趣点,也可点击 Reset 全部清空,或 Delete 删除某个兴趣点。8. 选择窗口上部 Setting 选项卡,进行基本设置。通常需要设置几个(Act.Light)可根据需要设置光化光的强度,数字对应的光强在AL-List 菜单 中查看,一般选用植物生长时的光强。数字对应的实际光强可在菜单栏 AL-List 中查看。一些必须的设置依照仪器说明设置。 (需注意 ImageCorrection:大探头选择 MAXI)9. 选择窗口上部 Image 选项卡,点窗口右侧下方的 Measure Abs.按钮,测定吸光系数,应该是 0.8 左右
3、。10.测量量子产量 Yield(F/Fm,)光适应。选择窗口上部 Setting 选项卡将 Act Light 中 Width 设置为 10s 11.选择窗口上部 Image 选项卡,保证 Ft 0.2,观察 Mean 值 0.2即可。若偏高,修改 Setting 中测量光参数 Int 和 Gain 值。12.点窗口下方 AL+Y,测定量子产量 Yield(F/Fm,)。13.测量 Fv/Fm,先将样品进行 20m 暗适应。14.选择窗口上部 Image 选项卡,点窗口右侧下方的 Measure Abs.按钮,测定吸光系数,应该是 0.8 左右.15. 点窗口下方 Fo,Fm;测量 Fv/F
4、m。如果提示光饱和调整Setting 中测量光参数 Int 和 Gain 值,保证 Ft 值在 0.10.2 之间。以上 9-15 是测量 Pam2100 的光反应和暗适应。以下为荧光诱导曲线测量和快速光响应曲线测量。16选择窗口上部 Image 选项卡,点窗口右侧下方的 Measure Abs.按钮,测定吸光系数,应该是 0.8 左右。17. 选择窗口上部 Kinetic 选项卡,单击窗口右侧的 Start 按钮,仪器开始测定荧光诱导曲线(持续约 5min)。18.选择保存图像。保存路径、文件名、保存图像格式。19.结束后,选择窗口上部 Report 选项卡,在窗口右侧选择需要的参数,点击窗口上部的导出数据按钮,将数据导出为 csv 文件(该文件可用 ExceL 打开),文件默认保存在 ImagingPamData_MINI 文件夹中。20.选择窗口上部 LightCurve 选项卡,单击窗口右 侧 Start 按钮,开始测定快速光响应曲线。 (如弹出要求保存数据可根据需要保存。弹出是否保存之前的 fofm 对话 框时,如果没有换叶片请选择是,如果更 换