大鼠灌注取脑3页.docx

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资源描述

大鼠灌注取脑用途:1.用于常规HE染色,免疫组化分析。2.冰冻切片可以不做脑组织固定。3.不可用于western blot和PCR。4.如果观察脑组织的缺血、损伤或其它病变时,不作灌注固定,而是在取出脑组织后作固定,将大大影响效果。原理:心脏灌流术能够快速冲净血液并在动物死亡前进行组织的前固定,避免了组织的自溶现象,是脑组织切片观察的常用方法。多聚甲醛使组织蛋白发生交联,以保持蛋白的原位和表面结构不变,从而能使其对应的抗体准确检测其表达位置和量。必要性:1.脑组织较软,且细胞成分不易保留,脑组织是较易软化的组织之一,血供也较为丰富,所以最好是在取脑组织前用4多聚甲醛灌注固。2.经前固定后,取脑操作时,可减少脑组织损伤。3.脑内血液都在,HE染色后,可去除红细胞背景影响。大鼠灌注取脑标准操作规程(SOP):流程:1) 麻醉 2)开胸 3)心脏左心室穿针,剪开右心耳 4)生理盐水冲水 5)4%多基甲醛固定 6)取脑 7)保存或切片.具体过程:大鼠经深度麻醉后,固定于自制的手术木板上,置于解剖盘中,开胸

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