实验5 细胞的传代培养一、实验目的熟练掌握动物细胞的传代培养法。二、实验原理哺乳动物细胞的传代培养是几乎所有细胞生物学实验的基础。当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释分种成多瓶，细胞才能继续生长,这一过程就叫传代。传代培养可获得大量细胞供实验所需。三、仪器、材料与试剂1仪器CO2培养箱，倒置显微镜，超净台2材料培养瓶，试管，移液管，巴斯德吸管，废液缸，75%酒精棉球，酒精灯，细胞。3试剂完全培养基（RPMLl640或DMEM），0.25%胰蛋白酶，D-Hanks液。四、实验步骤1.入无菌室之前用肥皂洗手，用75%酒精擦拭消毒双手。2.倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否需要传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液置37下预热。3.超净台台面应整洁，用75%酒精溶液擦净。4.打开超净台的紫外灯照射台面20min左右，关闭超净台的紫外灯，打开抽风机清洁空气。5.点燃酒精灯,取出无菌试管，刻度吸管；安上橡皮头；插在无菌试管内。6.打开细胞培养瓶，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上。7.倒掉培养细胞的旧培养基。
