实验室常用6种耐热DNA聚合酶总结1页.doc

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耐热dna聚合酶多应用在PCR技术中。各种耐热DNA聚合酶均具有5-3聚合酶活性,但不一定具有3-5和5-3的外切酶活性。3-5外切酶活性可以消除错配,切平末端;5-3外切酶活性可以消除合成障碍。由于上述这些不同,可以将耐热DNA聚合酶分为三类:一、普通耐热DNA聚合酶taq DNA 聚合酶由一种水生栖热菌yT1株分离提取出,是发现的耐热DNA聚合酶中活性最高的一种,达200,000单位/mg。具有5-3外切酶活性,但不具有3-5外切酶活性,因而在合成中对某些单核苷酸错配没有校正功能。TaqDNA聚合酶还要具有非模板依赖性活性,可将PCR双链产物的每一条链3加入单核苷酸尾,故可使PCR产物具有3突出的单A核苷酸尾;另一方面,在仅有dTTP存在时,它可将平端的质粒的3端加入单T核苷酸尾,产生3端突出的单T核苷酸尾。应用这一特性,可实现PCR产物的T-A克隆法。Tth DNA 聚合酶从Thermus thermophilus HB8中提取而得,该酶在高温和MnCl2条件下,能有效地逆转录RNA;当加入Mg2+后,该酶的聚合活性大大

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