悬浮细胞传代及细胞计数一、 细胞传代实验目的：掌握悬浮细胞传代技术。进一步掌握细胞培养的操作技术。实验原理：培养细胞生长一定时间后，需分离再培养，否则细胞因生存空间不够，细胞密度过大，致营养不足而引起细胞衰老、停止生长甚至死亡。为了维持细胞的存活和生长，必须进行再培养，即将原培养瓶内细胞分离、稀释、接种到新培养瓶内继续扩大培养。实验用品：（一）仪器净化工作台、离心机、恒温水浴箱、冰箱（4、-20、-70）、倒置相差显微镜、培养箱；（二）玻璃器皿吸管（弯头、直头）、培养瓶、废液缸、（三）塑料器皿吸头、枪头、胶塞、移液管、15ml离心管、离心管架（四）其他物品微量加样枪、计数板、记号笔、移液枪（五）试剂1640培养液、PBS操作步骤：1. 准备：打开培养液，PBS；取出离心管，拧开管盖，管盖倒放。从吸管筒中依次取出吸管，装上吸头，插入离心管备用。2. 从培养箱内取出细胞，放在显微镜下观察其生长状态、密度。3. 首先观察培养板孔中培养液量。用吸管分别吸出两个孔中的细胞连同培养液，转入
