1、烟草及烟草制品 抑芽丹农药残留量的测定 液相色谱串联质谱法标准编制说明1 工作简况1.1 任务来源及提出背景烟草及烟草制品 抑芽丹农药残留量的测定 液相色谱串联质谱法是国家烟草专卖局关于印发 2017 年度烟草行业标准制修订项目计划的通知（国烟科2017185 号）下达的 YC/T 标准制修订项目，合同号 2017B001。现行标准 YC/T 405.5-2011烟草及烟草制品 多种农药残留量的测定 第 5部分：马来酰肼残留量的测定 高效液相色谱法 于 2011 年发布实施，已成功应用于烟叶农药残留监测工作中，为卷烟产品质量安全控制及现代烟草农业发展提供了有力的支持。但实践中也发现，现行标准以
2、液相色谱法检测时存在干扰，影响抑芽丹的准确定性及定量。本项目的主要目的是针对以上问题，以液相色谱- 串联质谱法进行检测，对检测方法进行改进和完善，提高定性能力和检测结果的准确性和可靠性。1.2 项目承担单位、协作单位及主要分工项目由国家烟草质量监督检验中心牵头承担，郑州烟草研究院和湖北省烟草产品质量监督检验站共同承担，浙江中烟工业有限责任公司、福建中烟工业有限责任公司、广西中烟工业有限责任公司、贵州省烟草质量监督检测站、四川省烟草质量监督检测站、云南省烟草质量监督检测站协作完成。国家烟草质量监督检验中心负责国内外相关资料的调研与整理、方法的开发与建立、标准文本起草工作，郑州烟草研究院和湖北省烟
3、草产品质量监督检验站协作方法建立和验证，浙江中烟工业有限责任公司、福建中烟工业有限责任公司、广西中烟工业有限责任公司、贵州省烟草质量监督检测站、四川省烟草质量监督检测站、云南省烟草质量监督检测站参与方法验证工作。1.3 主要工作内容1.3.1 资料调研与整理项目在研制过程中对相关检测方法和文献资料进行了调研和整理。主要的标准检测方法如下：（1） YC/T 405.5-2011 烟草及烟草制品 多种农药残留量的测定 第 5 部分：马来酰肼残留量的测定 高效液相色谱法（2） ISO 4876-1980 Tobacco and Tobacco Products-Determination of Ma
4、leic Hydrazide Residues.国际标准方法 ISO 4876-1980 是基于水蒸气蒸馏-分光光度法检测，YC/T 405.5-2011 是基于酸液加热回流-液相色谱检测。主要的文献资料如下：（1） Wang L.J. et al., Development of microwave-assisted extraction and liquid chromatography-tandem mass sepectrometry for determination of maleic hydrazide residues in tobacco. Anal. Methods 201
5、5, 7, 5103-5107.（2） 廖雅桦等，凝胶渗透色谱-高效液相色谱-串联质谱法同时测定烟草中 3 种抑芽剂残留. 分析实验室J. 2010, 29, 72-75.（3） 陈晓水等，高效液相色谱-串联质谱法测定烟草中马来酰肼残留量. 质谱学报J. 2017, 38, 234-238.相关研究均以液相色谱-串联质谱进行检测、内标法定量。1.3.2 检测方法的建立和完善项目组参考收集的先关标准检测方法和文献资料，以 YC/T 405.5-2011 方法的前处理为基础，结合文献所报道的液相色谱-串联质谱法检测方法，对样品前处理过程进行了适当的简化，优化了化合物质谱参数，建立并完善了烟草中抑芽
6、丹农药残留检测的液相色谱串联质谱方法。并主要从线性范围、检出限、定量限、基质效应、回收率、重复性和再现性这几个方面对所建立完善的方法进行了系统评价。1.3.3 共同实验验证在确定测定方法的基本条件后，开始对此方法进行共同实验验证。实验选取了烤烟中抑芽丹农药残留成分分析标准物质（GBW(E)083046） 、白肋烟中抑芽丹农药残留成分分析标准物质（GBW(E)083047） 、香料烟中抑芽丹农药残留成分分析标准物质（GBW(E)083048）三种国家二级标准物质，进行实验验证。国家烟草质量监督检验中心、郑州烟草研究院、湖北省烟草产品质量监督检验站、福建中烟工业有限责任公司、浙江中烟工业有限责任公
7、司、四川省烟草质量监督监测站、深圳出入境检验检疫局、贵州省烟草质量监督检测站、云南烟草农业科学研究院共 9 家实验室参与了此次共同实验，比对结果良好。1.3.4 方法比对项目组分别将建立的方法与 YC/T 405.5-2011 和 ISO 4876-1980 进行了方法间比对。结果表明本方法的检测结果介于 YC/T 405.5-2011 方法和 ISO4876-1980 方法的检测结果之间，方法间相对平均偏差小于 13.1%。1.3.5 方法初稿起草2017 年 11 月，项目组在前期研究工作的基础上撰写了项目技术报告，完成了标准文本方法初稿的起草工作。1.3.6 征求意见阶段项目组根据项目组
8、成员反馈的意见及实验比对情况，完成了标准征求意见初稿，在行业内进行了意见征集。1.4 标准主要起草人员及其所做的工作主要起草人有：（在征求意见结束后，形成送审稿时再行增补有关名单）1.5 经费使用项目经费预算 30 万元，其中国家烟草质量监督检验中心 20 万元，郑州烟草研究院 10 万元，主要用于实验试剂及耗材的购买，执行情况良好。2 相关领域的国、内外标准研究和制修订情况烟草中抑芽丹检测的国际方法为 ISO 4876-1980 Tobacco and tobacco products Determination of Maleic Hydrazide Residues ，该方法较为老旧、操
9、作繁琐。2012 年，ISO/TC 126 决定开启此标准修订工作，主要考察了巴西提出的气相色谱法和我国 YC/T405.5-2011 高效液相色谱法，但均存在一定问题，主要是检测结果比 ISO 4876-1980 低很多，没有很好的比对性。2016 年 6 月，CORESTA 农残分学组开展了烟草抑芽丹检测的国际共同实验，在四组方法中，我国使用的液相色谱-串联质谱方法与 ISO 方法结果最为接近，CORESTA 推荐进一步加强液相色谱 -串联质谱方法研究。3 标准编制原则及主要内容的确定3.1 标准适用范围本标准规定了烟草及烟草制品中抑芽丹农药残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。本标准适用于
10、烟草及烟草制品中抑芽丹农药残留量的测定。3.2 标准编制原则标准的编制原则是：方法原理达到或接近国际标准先进水平，同时考虑国内烟草行业的实际情况，在不影响方法准确性和先进性的前提下，尽量结合简化的前处理方式和高灵敏度高选择性检测手段，提高检验效率。3.3 标准主要内容确定的依据本标修订项目在前期工作成果和应用实践经验基础上，参考了相关领域国内外的研究文献，按照化学类标准制修订方法补充规定的要求，结合烟草目前的实际情况进行编制。项目组根据选定的检测方法，按预定实验方案，对检测方法中涉及的相关条件实验及方法检出限、回收率等指标进行了严谨细致的试验，并在多家实验室间考察了方法的再现性。研究数据表明，
11、该分析方法稳定性和重复性好、准确性和精确性高，且该方法简便，快捷，易于在行业内推广，可应用于烟草和烟草制品中抑芽丹农药残留量的分析测定。具体情况详见项目技术报告。3.4 本标准与被修订标准在标准技术内容、水平方面的对比情况本标准是对行业标准 YC/T 405.5-2011 版的修订，在技术内容和水平方面对比情况如下：技术内容方面：（1）以GB 4839-2009 农药中文通用名称中规定的抑芽丹替代了马来酰肼；（2） 由于原标准在抑芽丹标准溶液配制过程以及样品净化过程中使用的是 0.1 mol/L 氢氧化钠溶液，必要性不强，取消了氢氧化钠溶液的使用；（3）以液相色谱-串联质谱检测方法，替代原标准
12、中的液相色谱法，从而也相应地调整了色谱柱、流动相的组成及洗脱梯度；（4） 以氘代抑芽丹为内标进行内标法定量，替代了原标准中的外标法定量，相应地取消了样品前处理中的定容过程。技术水平方面：对现有行业标准方法进行了以上改进和完善，进一步提高了检测方法的准确性和可靠性，与国际最新文献研究水平保持一致。4 标准预期产生的社会、经济效益本项目是烟草和烟草制品中抑芽丹农药残留量的测定标准，为烟草农药残留分析体系的构建、为烟草农药残留限量的监控和顺利实施提供了技术支撑，对于卷烟产品质量安全、吸烟与健康研究以及发展现代烟草农业等方面具有重要价值。5 采用国际标准和国外先进标准的情况目前,尚无目烟草及烟草制品中
13、抑芽丹农药残留量的测定液相色谱-串联质谱法的相关国际标准和国外先进标准，因此没有采用。6 与有关的现行法律、法规和强制性标准的关系本标准符合现行法律、法规和强制性标准的要求。7 重大分歧意见的处理经过和依据本标准制定过程无重大分歧意见。8 作为强制性标准或推荐性标准的建议及主要依据本标准建议作为推荐性行业标准发布。9 标准宣贯的要求和措施建议建议以培训班形式定期对各大烟草企业技术中心及各级烟草质检机构相关检验人员进行培训，并颁发资格证书。并定期进行分析结果水平测试，以提高相关机构的检测水平。10 废止现行有关标准的建议本标准针对YC/T 405.5-2011 烟草及烟草制品 多种农药残留量的测定 第 5 部分 抑芽丹农药残留量的测定 高效液相色谱法进行修订，建议以本标准替代 YC/T 405.5-2011。11 其他应予以说明的事项无。烟草及烟草制品 抑芽丹农药残留量的测定 液相色谱 -串联质谱法项目组2018 年 2 月 1 日
