1、丁香罗勒油透皮凝胶的制备及其体外透皮性能丁乐 1 董健 2 杨人泽 2*（1 赣州市妇幼保健院江西赣州 341000 2 赣南医学院第一附属医院 江西赣州 341000 ）摘要：目的 制备一种丁香罗勒油透皮凝胶，观察其体外透皮性能。方法 以具有良好生物相容性的亲水性高分子材料羧甲基纤维素钠和聚乙烯醇为辅料，制备丁香罗勒油透皮剂。采用改良 Franz 扩散池，以鼠背皮肤为屏障进行经皮渗透实验，气相色谱法检测丁香罗勒油（以丁香酚为指标）的经皮渗透量。结果 羧甲基纤维素钠和聚乙烯醇两种高分子骨架材料在凝胶基质中的浓度对丁香罗勒油透皮能力有较大的影响，以 25%含量（聚乙烯醇与羧甲基纤维素钠总量）为最
2、佳。结论 丁香罗勒油透皮凝胶可用作为丁香罗勒油的良好载体有望极大地提高其功效。关键词：丁香罗勒油；透皮凝胶；性能Preparation of Ocimum gratissimum L. oil transdermal gel and its skin penetration in vitroDING Le1, DENG Jian2， YANG Ren-ze2(1 Gan Zhou Maternal and Child Health Hospital, Gan Zhou Jiangxi 341000 2 The First Affiliated Hospital of Gan Nan Medic
3、al University Gan Zhou Jiangxi 341000)Abstract: Objective To prepare an Ocimum gratissimum L. oil transdermal gel and to investigate its skin penetration in vitro. Methods: An Ocimum gratissimum L. oil transdermal gel was prepared by using hydrophilic polymer sodium carboxymethyl cellulose and polyv
4、inyl alcohol each with good biocompatibility. In the experimental installation for skin penetration in vitro, the mouse dorsal skin was isolated as a barrier for percutaneous penetration experiments. The percutaneous infiltration quantity of Ocimum gratissimum L. oil (eugenol as the indicator) was d
5、etermined by high resolution gas chromatography. Results The ratio of polyvinyl alcohol and scarboxymethyl cellulose showed no significant effect on the transdermal ability of Ocimum gratissimum L. oil. But their concentration in the gel matrix had a certain influence on the transdermal ability of O
6、cimum gratissimum L. oil, and 25% content (total content of sodium carboxymethyl cellulose and polyvinyl alcohol) was optimal. Conclusion These results suggested that this kind of transdermal gel could be used as a good carrier for Ocimum gratissimum L. oil.Keywords: Ocimum gratissimum L. oil; Trans
7、dermal gel; Transdermal ability丁香罗勒油为唇形科植物丁香罗勒 Ocimum gratissimum L. 的全草经水蒸气蒸馏得到的淡黄色挥发油，有类似丁香的香气，味辛辣1，是香料和日用化妆品工业的重要原料。丁香罗勒油的主要成分是丁香酚，其次含有芳樟醇，罗勒烯等。丁香罗勒油能抑制细菌生长，促进破损皮肤自然愈合，对鼻塞、镇静安神都有良好的功效。丁香罗勒油在医药行业大量使用，可用于治疗各种皮肤瘙痒：慢性湿疹，脂溢性皮炎，日光曝晒所至瘙痒、脱皮、热疹，干燥手足癣，痤疮，疥疮，酒渣鼻，虱、蚤、蚊虫叮咬等2-5。为进一步提高丁香罗勒油的抗菌止痒功效以利于相关产品的开发，本文
8、制备了丁香罗勒油透皮凝胶，并观察了其体外透皮性能。1 材料和方法1.1 材料实验动物：BALB/c 小鼠，体重 2030 g，由赣南医学院动物中心提供。药品和仪器：羧甲基纤维素钠(CMC-Na，黏度为 300800 mPas，化学纯)，天津市恒兴化学试剂制造有限公司；聚乙烯醇(PVA，分析纯 )，大连海鑫化工；桉油，上海香料研究所；Na2S，聚乙二醇(PVAAH-26，化学纯)，国药集团化学试剂有限公司；甘油，江苏华神药业有限公司；氮酮( 化学纯) ，天津科捷制药有限公司；月桂醇，天津科密欧化学试剂有限公司；1，2-丙二醇 (分析纯)，上海三鹰化学试剂有限公司；无水乙醇(分析纯)， 上海试剂一
9、厂；油酸，上海远航试剂厂；丁香罗勒油，冠峰化工有限公司；丁香酚标准品，上海顺勃生物工程技术有限公司；Shimazu GS-2010 型高效气相色谱仪，日本岛津公司； HH-2 型数显恒温水浴锅，常州国华电器有限公司；07HWS-1 型数显恒温磁力搅拌器，杭州电机仪器仪表公司。1.2 方法1.2.1 丁香罗勒油透皮制剂的制备称取处方量的聚乙烯醇均匀撒于处方量的水中，加热 60 ，使聚乙烯醇（PVA）充分溶胀。随后均匀撒入处方量的羧甲基纤维素钠（CMC-Na ） ，使其充分溶胀。搅拌混合均匀，制得骨架材料混合物。然后加入处方量的甘油和促渗剂。搅拌均匀，加入丁香罗勒油。研匀，得载药凝胶基质。1.2.
10、2 丁香酚的测定气相色谱条件：以 100%二甲基聚硅氧烷（SE-30）为固定相，涂布浓度为 10%，不锈钢柱(2 m4 mm，0.25 m)，载体：高纯氮，体积分数99.999%；检测器：FID，柱温 110 。检测器温度 200 ，载气，氮气 50 mL/min，氢气，空气压力： 50KPa。线性关系：精密称取丁香酚标准品 0.5 g 置 25 mL 容量瓶中，加无水乙醇至刻度，配成浓度为 20 mg/mL 的溶液。然后用无水乙醇稀释成 1、2、4、8、12、16、20mg/mL 系列的对照品溶液，进样量 1 L。以样品浓度为横座标，峰面积为纵座标，作回归曲线，结果Y=28100X-9560
11、，r=0.9996，丁香酚在 1-20 mg/mL 范围内具良好的线性关系。1.2.3 体外透皮实验取 2030 g 健康小鼠，用 8%的 Na2S 溶液去毛。断颈处死，取背部皮肤，刮去皮下脂肪组织和粘连物，用蒸馏水和生理盐水冲洗干净，冷冻保存。将制备好的丁香罗勒油透皮制剂贴于体外鼠皮上，鼠皮的角质层向上，夹于扩散池中，使鼠皮下层紧密接触并排除气泡。使用自制的 Franz 扩散池，扩散池中以 PEG-400：生理盐水：乙醇=2：1：7 混合液为扩散介质。在接收室内加满扩散介质，水浴保温 37 ，内置搅拌子以 100 r/min 速度搅拌，分别于1，2，3，4，12，18，24 h 抽取接收室内
12、 0.5 mL 接收液，并迅速补充等体积。将取得的样品进行气相色谱测定其中丁香酚的量。1.2.4 数据处理测定抽取样品中丁香酚的浓度，按下列公式计算单位面积(cm 2)药物累积渗透量 Q：10/niQCVs上式中，C n 为第 n 个取样点质量浓度（mg/mL） ；V 0 为扩散池体积（mL ） ；C i 为第 i 个个取样点质量浓度（mg/mL） ； V 为取样体积（mL） ；s 为扩散面积（cm 2） 。将药物累积经皮渗透量Q（mg/ cm2）对应时间 t 作图得药物渗透曲线，对药物渗透曲线的稳态部分做切线，切线的斜率即为药物的经皮渗透速率。计算主要观察指标，药物累积经皮渗透量和经皮渗透速
13、率。采用 SPSS 13.0 软件进行统计处理。2 结果2.1 透皮接收液的筛选本实验首先筛选了透皮接收液。当以生理盐水作为接收液时，接收液中基本检测不到丁香酚，这可能是由于丁香酚不溶于水。丁香酚溶于乙醇。在接收液中加入乙醇，使生理盐水：乙醇=1 ：1，可以促进丁香酚在接收液中的溶解，但透过量仍较低。在接收液中加入 PEG-400，使 PEG-400：生理盐水：乙醇=2：1：7，丁香酚的透过量显著提高。这可能是由于漏槽条件的形成，使丁香酚的在接受液中的溶解性进一步提高。本实验采用 PEG-400、生理盐水、乙醇的混合液做为接收液。2.2 透皮凝胶材料的不同比例对透皮性能的影响在制备透皮凝胶时，
14、调整 PVA 和 CMC-Na 的用量比，控制丁香罗勒油的质量分数在 10%不变，按照以上方法制备丁香罗勒油透皮凝胶并用于体外透皮实验，计算其 24 h 的透皮速率，所得结果见下表表 透皮凝胶材料的不同比例对透皮性能的影响CMC-Na：PVA 透皮速率mg/(cm 2h)15 0.08324 0.09533 0.09942 0.09151 0.086由上表可知，PVA 和 CMC-Na 的用量比对丁香罗勒油透皮制剂的透皮性能没有显著影响。当 PVA 和 CMC-Na 的用量比为 33 时，测得透皮速率最高。但是此时制备的透皮凝胶需要较长时间搅拌，搅拌过程中出现气泡。当 PVA 和 CMC-Na
15、 的用量比为 24 时，制备的透皮凝胶表面光亮，搅拌时间较短，不含有气泡。综合考虑，本实验选用 24 的 PVA 和 CMC-Na 的用量比。2.3 PVA 和 CMC-Na 的总含量对透皮性能的影响PVA 和 CMC-Na 作为透皮凝胶中的骨架材料，其含量对丁香罗勒油的透皮性能具有很大影响。本文研究了丁香罗勒油最佳的透皮凝胶材料的总含量，见下图。图 PVA 和 CMC-Na 总含量对丁香罗勒油透皮凝胶的体外透皮性能的影响由上图可知，随着凝胶基质材料 PVA 和 CMC-Na 在丁香罗勒油透皮凝胶中总含量的增加，丁香酚的透皮量 Q 和透皮速率都有所增大。当 PVA 和 CMC-Na 的总含量为
16、 25%时，其透皮性能最佳。进一步增加 PVA 和 CMC-Na 的总含量时，透皮性能反而有所降低。3 讨论透皮给药系统或经皮吸收制剂（transdermal therapeutic systems，transdermal drug delivery systems，简称 TTS，TDDS）是指在皮肤表面给药，药物以恒定速度（或接近恒定速度）通过皮肤各层，进入体循环，产生全身或局部治疗作用的新制剂6。TDDS 有很多优点，它可以避免肝脏的首过效应；可维持稳定、持久的血药浓度；降低药物毒性和副作用，灵活给药等。自 1981 年美国上市第一个 TTS-Transderm Scop（东莨菪碱贴剂）以
17、来，目前已有多种药物透皮给药制剂上市6-9 。中国的医药学家对透皮制剂早有认识，在中国的医学典籍中收集了大量的用于局部和治疗内科疾病的膏药处方。近几年来各种形式的中药外用治疗呼吸系统、心血管系统、胃肠道等内科疾病取得了一定成绩。目前中国正以现代科学技术方法进行研究，提高中药外用功效。目前已有不少研究采用凝胶作为透皮给药剂型。凝胶剂是一种半固体制剂，药物溶解其中，具有溶胀性、脱水收缩性、透过性和粘合性7。将药物制成凝胶剂，可提高局部药物浓度，从而提高疗效8 。凝胶剂的优良特性跟所选用的凝胶材料的特性密不可分。合适的凝胶材料首先要保证透皮系统与皮肤充分、紧密的接触，使药物顺利扩散，迅速透过皮肤。同
18、时，它还要作为药物的贮存或载体材料9。因此选择合适的凝胶材料是丁香罗勒油透皮凝胶制备的关键问题之一。本文首先选择 PVA 和 CMC-Na 做为凝胶材料，两者用量比为 15-51。经试验确定二者的用量比为 24 时，制得的丁香罗勒油透皮凝胶具有较高的透皮速率。其中 PVA 是一种水溶性较强的高分子聚合物，具有独特的强力粘接性、皮膜柔韧性、平滑性、耐油性、耐溶剂性、保护胶体性、气体阻绝性、耐磨性等，是一种比较理想的凝胶材料。CMC-Na 具有粘合、增稠、乳化、保水、悬浮等作用，其在医药工业中可作针剂的乳化稳定剂、片剂的黏结剂和成膜剂，而且与聚乙烯醇具有良好的相容性。选择 PVA 和 CMC-Na
19、 作为凝胶材料可以防止丁香罗勒油的挥发，增大丁香罗勒油的载药量，从而使丁香罗勒油的透皮量达到最大。实验结果表明，PVA 和 CMC-Na 的用量比例对丁香罗勒油的透皮能力没有显著影响。二者的总共用量比重对丁香罗勒油的透皮能力则有较大影响。总用量比为 25%时，制备的丁香罗勒油透皮凝胶制剂具有最佳透皮能力。作者简介：丁乐，女，学士，主管药师，邮箱：; 电话:15970819966通讯作者：杨人泽，男，学士，副主任药师 邮箱： 电话:13979738268参考文献：1 国家药典委员会 . 中国药典, 一部S. 北京 : 中国医药科技出版社, 2010: 365.2 Pessoa LM, Morai
20、s SM, Bevilaqus CML, et al. Anthelmintic activity of essential oil of Ocimum gratissimum Linn. And eugenol against Haemoneh useoniortus J. Veterinary Parasitolog, 2002, 109(l-2): 59-63.3 周建新, 许华, 金浩. 丁香油抑菌效果和抑菌成分的研究J. 食品工业, 2003, 3: 24.4 Rompelberg CJM, Vogels JE, de-Vogel N, et al. Effect of short
21、term dietary administration of eugenol in human J. Human and Experimental Toxicology, 1996, 15(2): 129-135.5 李鸣宇 , 朱彩莲, 刘正. 天然植物提取液对变链菌胞外多糖的抑制Jl. 现代口腔医学杂志, 2004, 18(6): 481-482.郑俊民 . 6 经皮给药新剂型 M. 北京: 人民卫生出版社, 1997: 78.7 崔福德. 药剂学 M. 北京: 中国医药科技出版社, 2002: 545.8 董平, 孟现民, 沙先谊 , 等. 两种毗罗昔康凝胶体外经皮行为的比较J. 上海医药 2010, 31(8): 377-379.9 邢建国, 王新春, 赵媛 , 等. 复方卡力孜然凝胶剂主要活性成分体外经皮渗透J. 中国实验方剂学杂志, 2012, 18(3): 19-22.
