抗原修复方法及注意事项3页.doc

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资源描述

柠檬酸缓冲液高温高压抗原修复法(强烈推荐)1.适用范围:适合于大量中性福尔马林固定、石蜡包埋组织切片的抗原修复,其效果优于微波修复法和直接煮沸修复法,使得免疫组化结果更加可靠2.仪器设备:市售不锈钢家用压力锅,大小尺寸可根据需要而定(内径18cm为好);1000-1500W电炉一台;不锈钢或耐高温塑料切片架。3.所需试剂:0.01M柠檬酸型缓冲液,pH=6.00.14.操作步骤:(1)常规组织切片经二甲苯脱蜡、梯度酒精水化后,浸泡于蒸馏水中待用。(2)取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液(800-1500ml)于压力锅中,大火加热直至沸腾;将脱蜡水化后的组织切片置于不锈钢或耐高温塑料切片架上,放入已沸腾的缓冲液中。盖上锅盖,扣上压力阀,继续加热至喷汽,从喷汽开始计时,1-2分钟后,压力锅离开热源,冷却至室温(稍冷后,可在自来水笼头下加速冷却),取出玻片,先用蒸馏水冲洗两次,之后用PBS(pH=7.2-7.4)冲洗两次,每次3分钟(23)。(3)按有关试剂盒的操作步骤执行。5.注意事项:(1)加热时间长短的控制很重要,从组织切片放入缓冲液到高压锅离

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