1、2019 年辽宁省职业院校技能大赛（高职组）鸡新城疫抗体水平测定赛项规程一、赛项名称赛项编号：LNGZ201901赛项名称：鸡新城疫抗体水平测定赛项组别：高职组赛项归属产业：农林牧渔二、竞赛目的本赛项由学校、行业、企业共设，通过技能竞赛，能有效促进全省高职院校畜牧兽医类专业之间的交流，引领专业建设与课程改革；能进一步深化学校与企业之间的合作交流，加大行业人才队伍建设力度，提升行业产业发展水平。同时，通过本赛项的资源转化，可以向社会展示畜牧兽医类专业的师生风采和建设成果，提高专业的教学水平，提升人才培养质量。三、竞赛内容本赛项为鸡新城疫抗体水平测定（微量法） ，测定方法按新城疫诊断技术 （GB/
2、T16550-2008）标准，竞赛时间为 180 分钟。具体步骤及其分值如下：（一）试验器材准备（占总成绩的 8%）按照操作规程进行器材准备，要求器材选择正确、摆放有序，物品标识合理，桌面整洁等。（二）配制 1%鸡红细胞悬液（占总成绩的 18%）按照操作规程进行采血、离心、洗涤、配制 1%鸡红细胞悬液，要求采血规范、熟练、采血量适量、离心机使用规范、洗涤次数及洗涤时间适宜、配制过程规范、1%鸡红细胞量适宜等。（三）血凝试验（占总成绩的 20%）按照操作规程，用微量移液器在 96 孔 V 型血凝反应板 1-12 孔滴加稀释液、新城疫标准抗原，充分混匀，倍比稀释后，再次滴加稀释液，再添加 1%鸡红
3、细胞悬液，充分振荡混匀，静置感作适当时间后，正确判定抗原的血凝效价。要求微量移液器使用规范、倍比稀释操作规范、结果判定正确等。（四）配制四单位病毒（占总成绩的 10%）根据血凝试验结果，按照操作规程配制四单位病毒。要求稀释倍数计算正确，稀释液体积加入得当、四单位病毒配制量适宜等。（五）血凝抑制试验（占总成绩的 20%）按照操作规程，对 20 个被检血清进行血凝抑制试验操作，并设新城疫标准阳性血清对照、阴性血清对照；正确读取标准阴性血清、标准阳性血清及被检血清的结果，确定抗体滴度，完成报告。要求移液器使用规范、反应板各孔的稀释正确、感作时间得当、对照成立、结果判断正确等。（六）抗体滴度报告（占总
4、成绩的 24%）按照操作规程，正确判定抗体滴度，完成报告。要求抗体滴度判读正确、报告方式正确、结果误差符合要求、场地整洁等。四、竞赛方式本赛项为团体赛。每组参赛学生 2 名，比赛由 2 名学生配合完成，参赛选手均为高职院校在籍学生，不得跨校组队。五、竞赛流程本项目竞赛日程与流程安排见表 1。表 1 项目竞赛日程安排表时间 主要工作第 1 天 15:00 场次抽签7:00 全体参赛选手比赛检录及参赛编号抽签开始7:20 第一场比赛工位号抽签，选手进入比赛场，按工位号就位7:35 裁判组成员进入比赛场8:0011:00 选手操作，裁判评分11:00 11:30 裁判组评分汇总12:20 第二场比赛
5、工位号抽签，选手进入比赛场，按工位号就位12:35 裁判组成员进入比赛场13:00 16:00 选手操作，裁判评分16:00 16:30 裁判组评分汇总第 2 天16:30 17:30 成绩汇总六、竞赛赛卷本赛项不设理论考试，只对操作技能进行综合考核，技能竞赛题为公开赛卷，见本赛项规程的竞赛内容。七、竞赛规则1.参赛选手须为高职院校全日制在籍专科学生；本科院校中高职类全日制在籍学生；五年制高职四、五年级学生。参赛选手必须持本人身份证和参赛证参加比赛。参赛选手年龄须不超过 25 周岁，年龄计算时间截止 2019 年 5 月 1 日。凡在往届全国职业院校技能大赛中获一等奖的选手，不能再参加同一项目
6、同一组别的比赛。2.参赛选手和指导教师报名获得确认后不得随意更换。如比赛前参赛选手和指导教师因故无法参赛，须由院校相关部门于本赛项开赛 10 个工作日之前出具书面说明，经大赛组委会办公室核实后予以更换。竞赛开始后，参赛队不得更换参赛队员。3.参赛选手出场顺序、位置、比赛所用器材等均由抽签决定，不得擅自变更、调整。4.参赛选手提前 30 分钟检录进入赛场，按照抽签工位号参加比赛，竞赛开始后迟到 15 分钟以上者取消比赛资格；开赛 30 分钟后，选手方可离开赛场。5.选手进入赛场后须检查实验用品是否齐全，如有疑问向裁判询问。选手在竞赛过程中不得擅自离开赛场，如有特殊情况，需经裁判同意，选手若需休息
7、、饮水或去洗手间等，耗用时间计算在比赛时间内。6.选手应在竞赛试卷或实物标签上填写工位号。试卷（或实物标签）上不得有任何暗示选手身份的记号和符号，否则取消成绩。比赛过程中如果动物出现死亡等意外情况，举手示意，可更换实验动物。各参赛选手要按照规定做好详细记录；判定试验结果时要举手示意裁判。7.竞赛在规定时间结束时，选手应立即停止操作，不得以任何理由拖延。选手若提前完成操作，需举手示意，由裁判员记录结束时间，确认后方可离开比赛现场。八、竞赛环境赛场照明、控温良好。赛场内设有相对独立的长实验台并标明编号，选手根据抽签结果在相应的实验台完成比赛。赛场内设置摄像头，可将实时赛况直播到观摩室。九、技术规范
8、本赛项以教育部颁布的职业院校相关专业教学指导方案和国家职业标准动物疫病防治员 （三级）规定的知识和技能要求为基础，依据新城疫诊断技术 （GB/T16550-2008）标准，确定比赛内容及方式。十、技术平台仪器设备按新城疫诊断技术 （GB/T16550-2008）标准要求配制。本赛项所用的仪器、设备与材料见表 2。表 2 项目竞赛用仪器、设备与材料序号 器材或设备名称 数量 规格1 托盘天平 1 台 500g2 离心机 1 台 L6003 微型振荡器 1 台4 微量移液器 1 支 0.005 0.05 mL5 微量移液器 1 支 0.11 mL6 微量移液器 1 支 210 mL150 个 0.
9、005 0.05 mL20 个 0.11 mL7 微量移液器吸头10 个 210 mL2 个 0.005 0.05 mL1 个 0.11 mL8 微量移液器吸头盒1 个 2-10mL9 板式微量移液器架 1 个10 96 孔 V 型血凝反应板 5 块5 个 50 mL11 烧杯2 个 500 mL2 支 5 mL12 禽用采血器2 支 10mL13 具盖塑料离心管 6 支 15 mL14 指型离心管 6 支 1.5 mL15 试管架 1 个16 指型离心管架 1 个17 细记号笔 1 支18 实验白大褂 2 件19 0.9%生理盐水（或0.9%氯化钠注射液） 500 mL20 3.8%枸橼酸钠
10、溶液 20mL21 鸡新城疫标准抗原 1 份22 被检血清样本 20 个23 鸡新城疫标准阳性血清 1 份24 鸡新城疫标准阴性血清 1 份25 75%酒精棉球 若干26 干棉球 若干27 非免疫公鸡 1 只28 科邦灭菌橡胶外科手套 4 副29 医用防护口罩 2 只30 实验报告单 1 张31 标签纸 若干33 A4 纸 2 张34 签字笔 2 支十一、成绩评定成绩评定按照公平、公正、客观的原则进行。（一）评分方法本赛项采取过程评分的方式评分，结果评定采用百分制。竞赛现场每位裁判对每一组选手分别打分，由项目裁判组统一评分，得分的算术平均值作为参赛队伍的最后得分。各裁判员首先审核选手原始打分成
11、绩，并签名；赛项裁判长对所有裁判员的打分成绩进行审核，并签名。（二）成绩审核为保障成绩评判的准确性，监督组将对赛项总成绩排名前 30%的所有参赛队伍（选手）的成绩进行复核；对其余成绩进行抽检复核，抽检覆盖率不得低于 15%。如发现成绩错误以书面方式及时告知裁判长，由裁判长更正成绩并签字确认。复核、抽检错误率超过5%的，裁判组将对所有成绩进行复核。（三）成绩公布记分员将解密后的各参赛队成绩汇总成最终成绩单，经裁判长、监督组签字后，在指定地点、以纸质形式进行公布。项目技能竞赛评分标准见表 3。表 3 项目技能竞赛评分标准序号 考核内容 考核要点 分值 评分标准一试验器材准备（8 分）仪器与材料准备
12、 2仪器正确准备，1 分；材料准备到位，1 分。参考评分要点：未检查清点仪器材料，仪器使用不正确，材料准备不到位，口罩、灭菌橡胶外科手套穿戴不规范，酌情扣分。序号 考核内容 考核要点 分值 评分标准物品标识 4标识合理，2 分；标识清晰，2 分。参考评分要点：使用的烧杯、离心管（包括管盖）和血凝反应板均要标记；标识遗漏或标识不清，酌情扣分，不标识不得分。桌面整洁度 2摆放合理，2 分；参考评分要点：试验器材无序摆放，不得分。采血方法和采血量 6抗凝剂适量，2 分；采血方法规范、熟练， 2 分；采血量控制在 2-4mL 之间，2 分。参考评分要点：鸡正确保定；血液与抗凝剂比例 4:1；采血时，鸡
13、放置于鸡笼上保定；采血部位宜首选翅静脉；采血部位合理消毒；采血时一针见血；采血量控制在 24mL 之间用干棉球按压止血；采血后采血局部未见明显血肿；采血未成功的，该项不得分。*以上细节未规范操作，酌情扣分，累加 6 分扣完为止。二配制 1%鸡红细胞悬液（18 分）离心机使用 4离心机使用规范，4 分。参考评分要点：离心前做好平衡，对称放入离心机中；规范使用天平，应“左物右码” ；*以上细节未规范操作，酌情扣分，累序号 考核内容 考核要点 分值 评分标准加扣完 4 分为止。红细胞悬液配制方法 8稀释液倍数正确，2 分；离心机转数、离心时间正确，2 分；红细胞洗涤次数适宜，2 分；压积红细胞吸取正
14、确，2 分。参考评分要点：红细胞洗涤时，用 34 倍体积的灭菌生理盐水进行稀释，稀释后离心管中液体体积最大不可超过 12mL；红细胞洗涤时灭菌生理盐水与红细胞充分混匀；离心参数设定：2000 r/min，5 10 min/次；红细胞洗涤时吸除血浆和白细胞等杂质；红细胞洗涤应 35 次；最后配置 1%红细胞悬液为 1020 mL；*以上细节未规范操作，酌情扣分，累加扣完 8 分为止。三血凝试验（20 分） 器材使用 4微量移液器使用规范，2 分；吸头更换操作符合规范，2 分。参考评分要点：加吸头时操作规范，不可用力撞击吸头盒；微量移液器量程设置准确；微量移液器吸取和打出液体操作规范，移液器垂直加
15、样为规范，倾斜角度不要过大；微量移液器用完后应置于移液器架，不得随意放于桌面；* 以上细节未规范操作，酌情扣分，序号 考核内容 考核要点 分值 评分标准累加扣完 4 分为止。操作程序 6吸取试剂更换吸头，2 分；加样顺序正确，1 分；倍比稀释操作规范，2 分；振荡及感作时间得当，1 分。参考评分要点：稀释液加样完成后，在吸取待检样品前需更换吸头；1%红细胞悬液加之前应充分混匀；边滴加边震荡混匀，按由病毒低浓度往高浓度的方向加样；倍比稀释时不产生气泡；倍比稀释时混匀充分，移液正确；加样时，吸头与液面、孔壁不接触；试剂不滴加到孔外；可以使用振荡器，以液体不震出来为准；固、液废弃物分开放置。*以上细
16、节未规范操作，酌情扣分，累加扣完 6 分为止。结果判定准确 10能依据生理盐水对照孔的 RBC 呈明显钮扣状沉到孔底时判定结果，4 分；对照孔结果正确时，能确定完全凝集的新城疫标准抗原最高稀释倍数为病毒的血凝价，4 分；能把完全凝集的病毒的最高稀释倍数作为 1 个血凝单位，2 分。参考评分要点：判定血凝价时机不正确扣 4 分（必须是完全凝集） ；结果判定不正确扣 4 分；对照孔凝集扣 4 分；序号 考核内容 考核要点 分值 评分标准HA 重复 3 排，少做 1 排扣 1 分；未做记录扣 2 分；读数时，结果有跳孔现象的，每跳 1孔扣 2 分。*以上细节累计扣完 10 分为止。器材选择 4器材选
17、择合理，2 分；使用规范、熟练，2 分。参考评分要点：加吸头时操作规范，不可用力撞击吸头盒；选择合适量程微量移液器移取样品；微量移液器吸取和打出液体操作规范；*以上细节未规范操作，酌情扣分，累加扣完 4 分为止。配制方法 4稀释倍数计算正确，2 分；稀释液加入得当、操作规范，2 分。参考评分要点：计算错误扣 2 分微量移液器选择适宜，设置准确，未规范操作酌情扣分。四配制 4 个血凝单位病毒溶液（10 分）配制量适宜 2配制量适宜，2 分；参考评分要点：配置量 10-20 mL 为适量，每超过 10 mL 扣 1 分，最多扣 2 分。五血凝抑制试验（20 分） 器材使用 4器材使用规范、熟练，4 分；参考评分要点：加吸头时操作规范，不可用力撞击吸头盒；微量移液器量程设置准确；微量移液器吸取和打出液体操作规范，移液器垂直加样为规范，倾斜角度不
