植物组织切片制作以及注意事项(精)5页.doc

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植物组织石蜡切片的制作以及注意事项1 植物组织石蜡切片的制作方法固定:用50%或70% FAA固定液(50%或70%酒精:甲醛:冰乙酸=16:1:1; 幼嫩材料用50 % FAA;老的材料用70%的FAA,置于4固定24 h。脱水:将固定液倒去,加入50%乙醇,室温静置30 min;重复一次,室温静置20 min。换成1%番红O溶液(用70%酒精配制,室温脱水染色过夜。次日继续脱水,酒精浓度梯度和时间依次为:80% 乙醇1h、95% 乙醇1h、无水乙醇1h、40min(2次。透明:1/2无水乙醇+二甲苯混合液1h,纯二甲苯1h、40 min(2次。最后加入少量二甲苯(浸没材料即可和碎蜡,放入38温箱中过夜。浸蜡:将温箱温度调至56,计时1h;换成二级蜡1h;三级蜡(3次各1h、1h、40min(从温度上升到56开始计时。包埋:将带有材料的液体蜡倒入叠好的纸槽中,迅速放入冰水中使蜡凝固,防止气泡产生,以及凝蜡不匀。切片:修整蜡块,用Lica RM2126切片机切片,厚度5-10 m。贴片: 在载玻片上涂少许粘

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