小鼠脑源性神经营养因子BDNF酶联免疫分析.DOC
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1、 小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 96T3ng/L - 160ng/L使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中脑源性神经营养因子(BDNF)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)水平。用纯化的小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脑源性神经营养因子(BDNF),再与 HRP标记的脑源性神经营养因子(BDNF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗 涤后加底物 TMB 显色。TMB 在HRP 酶 的催化下 转
2、化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的脑源性神经营养因子(BDNF)呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)浓度。试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液 20ml1瓶6ml1瓶12孔8条6ml1瓶6ml1瓶6ml1/瓶789终止液 6ml1瓶0.5ml1瓶1.5ml1瓶1份2 酶标试剂 标准品(320ng/L)标准品稀释液3 酶标包被板4 样品稀释液5 显色剂 A液6 显色剂 B液10 说明书11 封板膜12 密封袋2张1个标本要求1标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若
3、不能马上进行试验,可将标本放于-20保存,但应避免反复冻融2不能检测含NaN3的样品,因 NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP )活性。操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。160ng/L80ng/L40ng/L20ng/L10ng/L5号标准品4号标准品3号标准品2号标准品1号标准品150l的原倍标 准品加入 150l标准品稀释液150l的 5号标 准品加入 150l标准品稀释液150l的 4号标 准品加入 150l标准品稀释液150l的 3号标 准品加入 150l标准品稀释液150l的 2号标 准品加入 150l标准品稀释液2. 加样
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