流式细胞仪试验方法(共17页).doc

流式细胞仪实验方法一、 实验准备1 标本制备：2 最小化非特异性结合：二、凋亡1凋亡的检测方法：网站和其它2PI染色法3Annexin V 法4TUNNEL法三、细胞因子1激活的细胞因子2CBA四、血小板1活化2活化检测3网织血小板五、红细胞1网织红细胞2PNH3胎儿红细胞六、肿瘤学1DNA 细胞周期2蛋白3多药耐药4微小残留白血病第一部分 标本处理一、流式细胞术常规检测时的样品制备 (一)直接免疫荧光标记法 取一定量细胞(约1X106细胞ml)，在每一管中分别加入50l的HAB，并充分混匀，于室温中静置1分钟以上(),再直接加入连接有荧光素的抗体进行免疫标记反应(如做双标或多标染色，可把几种标记有不同荧光素的抗体同时加入)，。孵育20-60分钟后，用PBS(pH7274)洗1-2次，加入缓冲液重悬，上机检测。本方法操作简便，结果准确，易于分析，适用于同一细胞群多参数同时测