细 胞 分 选 的 简 要 操 作 步 骤一、上样前的准备FACSCalibur可以分选细胞进行培养或功能性研究,而这些研究需要清洁环境以保持分选后细胞不受污染继续培养,因此在样本制备,上机检测分选等过程中需严格按无菌技术操作。1、 应用无菌技术制备下列无菌工作液。l 3L 70% 乙醇(用无菌蒸馏水配制)l 5L 无菌蒸馏水l 5L 无菌PBS2、 在干净的鞘液筒中加入3L 70% 乙醇。盖紧盖子,振摇鞘液筒,确保桶内壁被乙醇充分洗涤。安好鞘液筒。3、 将过滤器短接,否则乙醇将破坏滤膜。4、 用70%乙醇冲洗收集管接口处,并喷洒进样口处的空气。5、 在收集管接口处安装2支BD 50ml收集管(若不使用浓缩器)。6、 放上一支装有70 % 乙醇的进样管。7、 设分选门(画一个空门使机器进行分选操作)。9、 从Acquire menu选择SortSetup 。在Sort Gate菜单中选择步骤设定的分选门。按液流控制键RUN。10、 在Setup方框中打叉,点击Acquisition Control菜单中Acquire。